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A criopreservação de células animais frequentemente é realizada adicionando-se dimetils...
A criopreservação de células animais frequentemente é realizada adicionando-se dimetilsulfóxido (DMSO) à suspensão celular antes do congelamento controlado a uma taxa aproximada de 1 °C/min, seguido do armazenamento sob imersão em nitrogênio líquido (-196 °C). Posteriormente, quando se deseja realizar a recuperação das células, recomenda-se o descongelamento rápido em banho-maria a 37 °C, seguido da remoção imediata do DMSO. Considerando os princípios envolvidos nesses procedimentos, assinale a alternativa correta.
A
A taxa lenta de congelamento inicial evita a formação de cristais de gelo entre as células, enquanto o DMSO congela instantaneamente na fase de congelamento rápido, quando ocorre a imersão em nitrogênio líquido, vitrificando o citoplasma celular.
B
O congelamento gradual, na presença de DMSO, evita o rompimento das membranas celulares, enquanto o descongelamento rápido permite que estas se reorganizem rapidamente evitando o influxo osmótico de água causado pela presença do crioprotetor.
C
O DMSO age como agente tamponante que impede a variação brusca do pH intracelular que ocorre durante o congelamento sob imersão em nitrogênio líquido e deve ser imediatamente removido após o descongelamento para permitir a recuperação do metabolismo celular.
D
Durante o congelamento gradual, a taxa metabólica das células é diminuída, e o DMSO é utilizado como fonte de energia alternativa para manter as células viáveis, sendo sua remoção necessária após o descongelamento para evitar hiperatividade metabólica.
E
O DMSO atua como crioprotetor, reduzindo a nucleação e a formação de cristais de gelo intracelular, e sua remoção imediata logo após o descongelamento serve para reduzir sua potencial toxicidade às células.