É o método mais utilizado, porém com eficácia pouco confiável.

Baseia-se na coagulação e desnaturação de enzimas e estruturas protéicas.

A autoclave necessita ser validada por meio de sistemas controle químicos e/ou biológicos apenas mensalmente, dispensando a avaliação diária.

Pode ser uma opção adequada para materiais sensíveis ao calor e umidade.