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A técnica de PGR (Reação em Cadeia da Polimerase) é amplamente utilizada em estudos do ...
A técnica de PGR (Reação em Cadeia da Polimerase) é amplamente utilizada em estudos do DNA e RNA. A sequência correta dos passos básicos desta técnica laboratorial, resultando em trechos de DNA isolados e prontos para análises posteriores (análise ou leitura do DNA), é:
A
primeiro ciclo: desnaturar DNA (altas temperaturas, +/- 70°C), paralisar reações enzimáticas; segundo ciclo: Precipitação em álcool; terceiro ciclo: iniciadores (primers) agindo sobre DNA. Replicação de molde de DNA, ação da DNA polimerase.
B
primeiro ciclo: desnaturar DNA (altas temperaturas, +/- 90ºC), paralisar reações enzimáticas; segundo ciclo: iniciadores (primers) agindo sobre DNA; terceiro ciclo: replicação de molde de DNA, ação da DNA polimerase. Repetição dos ciclos, amplificação do DNA.
C
primeiro ciclo: desnaturar DNA (altas temperaturas, +/- 90ºC), paralisar reações enzimáticas; segundo ciclo: Precipitação em álcool; terceiro ciclo: iniciadores (primers) agindo sobre DNA. Replicação de molde de DNA, ação da DNA polimerase. Repetição dos ciclos, amplificação do DNA.
D
primeiro ciclo: iniciadores (primers) agindo sobre DNA; segundo ciclo: desnaturar DNA (altas temperaturas, +/- 90°C), paralisar reações enzimáticas; terceiro ciclo: replicação de molde de DNA, ação da DNA polimerase. Repetição dos ciclos, amplificação do DNA.
E
primeiro ciclo: ação enzimática + detergentes aniônicos: precipitação em álcool; segundo ciclo: desnaturar DNA (altas temperaturas, +/- 70°C), paralisar reações enzimáticas; terceiro ciclo: replicação de molde de DNA, ação da DNA polimerase. Repetição dos ciclos, amplificação do DNA.