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A reação em cadeia da polimerase (PCR) é uma técnica que...
A reação em cadeia da polimerase (PCR) é uma técnica que mimetiza, in vitro, o processo de replicação do material genético que ocorre naturalmente durante a multiplicação celular. Esta técnica foi inicialmente desenvolvida em 1983 por Kary Mullis e desde então tem sido aprimorada, hoje sendo amplamente utilizada na área da pesquisa e diagnóstico. Para que esta reação ocorra, sabe-se que:
A
o tamanho ideal de um primer (iniciador) é de aproximadamente 100-150 pb.
B
o excesso de MgCl2 aumenta a velocidade da reação por potencializar a ligação dos primers (iniciadores).
C
a diferença da temperatura de anelamento de um par de primers (iniciadores), forward e reverse deve ser pequena, preferencialmente inferior a 5 °C.
D
nas reações multiplex, os diferentes primers (iniciadores) utilizados devem apresentar temperaturas de anelamento distintas.