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A seleção do modo cromatográfico para purificação de...
A seleção do modo cromatográfico para purificação de proteínas e metabólitos exige compatibilizar propriedade dominante do analito e mecanismo de retenção do leito, considerando pH efetivo, força iônica, polaridade e raio hidrodinâmico. À luz de Snyder, Kirkland & Dolan (2010) e Ladisch (2001), qual assertiva está correta sem ressalvas?
A
Afinidade baseia-se em adsorção inespecífica ao leito, viabilizando captura universal por interações de van der Waals, independentemente de ligantes de reconhecimento.
B
Exclusão por tamanho (SEC) promove ordenação por coeficiente de partição dependente de polaridade, eluindo pequenas primeiro por maior interação hidrofóbica intraporos do suporte.
C
Troca iônica separa por carga líquida efetiva, modulada por pH próximo ao pI e por força iônica do eluente, permitindo eluição por saltos de sal ou gradientes de pH controlados.
D
Fase reversa (C18) é preferível para proteínas nativas, pois preserva atividade enzimática sob eluição com solventes orgânicos, mantendo dobramento e função catalítica.
E
Cromatografia gasosa permite análise direta de proteínas intactas sem derivatização, por volatilização sob temperaturas moderadas e colunas apolares clássicas.