Se em uma reação de sequenciamento pelo método de Sanger,
o análogo didesoxi do CTP (ddCTP) fosse acrescentado à
mistura de reação em uma concentração maior que aquela do
dCTP, isso poderia afetar os resultados da seguinte forma:
A
os trechos sequenciados seriam mais longos do que aqueles
que seriam obtidos com concentrações menores de ddCTP
devido à pouca afinidade da DNA polimerase por esse
substrato.
B
na presença de excesso de ddCTP, o DNA polimerase não
daria início à reação de duplicação da cadeia molde e não
seriam obtidos produtos.
C
os trechos sequenciados apresentariam excesso de
nucleotídeos da citosina, o que introduziria um viés nos
resultados.
D
seriam formados mais oligonucleotídeos de cadeia dupla
nos quais a citosina e a guanina estariam pareados e, devido
à maior estabilidade dessa ligação, ocorreria a interrupção
da reação da polimerase.
E
seria impossível sequenciar inteiramente o DNA, uma vez que
aumentaria muito a probabilidade de que ddCTP fosse
incorporado na cadeia e assim, interrompesse prematuramente
a reação da polimerase.