A coloração de Gram consiste em submeter o esfregaço bacteriano a um tratamento com vários reagentes. A seqüência correta do emprego dessas substâncias é:
Violeta, fuccina, álcool, lugol.
Azul de metileno, fuccina, álcool, lugol
Lugol, álcool, violeta e fuccina.
Violeta, lugol, álcool, azul de metileno.
Violeta, lugol, álcool, fuccina.