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A histoplasmose clássica é causada pelo Histoplasma capsulatum var. capsulatum. O método diagnostica mais seguro é:
Pela inoculação em camundongos ou cobaias da forma micelial.
Cultivo de material da lesão em ágar Sabourad glicose, com ou sem adição de cloranfenicol e cloheximida.
Através de provas sorológicas para demonstração de IgG específica, prova s de provocação e pesquisa de fungos no meio ambiente frequentado pelo paciente.
O isolamento do fungo, em cultivo, utilizando se de ágar Sabourad dextrose e ágar infuso de cérebro coração, acrescidos de ciclo-heximida e cloranfenicol, respectivamente, incubados a temperatura de 25 e 37ºC.
Pela inoculação intracerebral de material infectado em camundongos jovens e posterior recuperação do fungo.