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A informação contida nas sequências de nucleotídeos das moléculas de DNA (ácido desoxirribonucleico) e RNA (ácido ribonucleico) é tão rica, que possibilita diagnosticar uma doença genética e diferenciar cepas de micro-organismos patogênicos. Considere as principais etapas de extração de ácidos nucleicos evidenciados a seguir e assinale afirmativa correta.
1.Lise celular ➨ 2. Purificação ➨ 3. Precipitação DNA ➨ 4. Lavagem ➨ 5. Ressuspensão
A etapa de ressuspensão do DNA deve ser realizada, preferencialmente, em etanol ou clorofórmio.
A lavagem do DNA é realizada com água deionizada para a remoção dos sais, detergentes e de outras impurezas
Em condições de baixa temperatura e elevada concentração salina, a adição de etanol absoluto, isopropanol, ou soluções de acetato de amônio, ou sódio resulta na precipitação do DNA.
A lise celular envolve o rompimento das células. Deve-se evitar o uso de soluções tamponadas, ou que apresentem cisplatina, cloreto de sódio e EDTA (ácido etilenodiamino tetra-acético).
O reagente tris-hidroximetil aminometano (etapa de lise celular) mantém o pH da solução próximo a 8, favorecendo que o DNA, ao ser liberado, sofra o ataque das enzimas que o degradam.