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As enzimas produzidas naturalmente nos seres humanos desempenham atividades essenciais para a vida. A enzima que nos eritrócitos estabiliza a membrana contra danos oxidativos, e sua defi ciência caracteriza uma condição genética, é conhecida como:
glicose-6-fostado desidrogenase
gama glutamil transferase
5-fosforriboisomerase
frutose-P-aldolase
As mutações são alterações hereditárias do material genético de um organismo, decorrentes de erros de replicação antes da divisão celular, mas que não são causadas por recombinação ou por segregação. Sobre as mutações de ponto, é correto afirmar que
são alterações de um único par de bases no DNA ou de um pequeno número de pares de bases adjacentes.
a transversão é um tipo de mutação de ponto em que ocorre a inserção ou a deleção de uma base do DNA.
na mutação sem sentido, a substituição de uma base ocasiona a troca do aminoácido por outro aminoácido quimicamente diferente.
na mutação de sentido trocado (não conservativa), a substituição de uma base ocasiona a codificação de um aminoácido quimicamente semelhante.
A análise de polimorfismo de comprimento de fragmento de restrição terminal (T- RFLP) é uma técnica molecular muito útil na identificação de espécies microbianas e suas cepas.
Sobre essa metodologia, assinale com V as afirmativas verdadeiras e com F as falsas.
( ) Na metodologia T- RFLP, um gene alvo é amplificado por PCR, e o produto dessa reação é tratado com enzimas de restrição que corta o DNA em regiões específicas. Isso gera uma série de fragmentos de DNA de comprimento variável, cujo número depende de quantos cortes para enzima de restrição estão presentes nessa sequência amplificada.
( ) A clivagem de amostras diferentes por uma mesma enzima de restrição pode gerar um conjunto de fragmentos de tamanhos diferentes.
( ) Na amplificação do DNA alvo pelo método de PCR, são utilizados iniciadores marcados com corantes fluorescentes. Após a ação das enzimas de restrição, os fragmentos com a extremidade terminal marcada por fluorescência são separados por eletroforese em gel e dimensionados em um sequenciador de DNA automatizado.
( ) Essa técnica permite a identificação de diferentes microrganismos e suas cepas, entretanto não fornece informações sobre a diversidade populacional de uma comunidade bacteriana.
Assinale a sequência correta.
V F V V
F V F F
F F F V
V V V F
Os marcadores tumorais são substâncias circulantes, presentes no sangue ou outros fluídos corporais, ou marcadores genômicos, ligados a diferentes tipos de alterações genéticas. Neste aspecto, o marcador circulante para monitorar a resposta ao tratamento e avaliar a recidiva do câncer de ovário e o marcador genômico para detectar a mutação de genes indicativos de tumores de ovários e mama são respectivamente
CA19-9 e rearranjo do ALK.
CA-125 e rearranjo do ALK.
CA-125 e Mutação BRCA 1 ou BRCA2.
CA19-9 e Mutação BRCA 1 ou BRCA2.
Sobre os distúrbios hereditários associados ao aumento de trombose, assinale a afirmativa correta.
A hemofilia A apresenta aumento no tempo de protrombina (TAP).
A mutação Leiden do Fator V não apresenta alongamento no tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA) quando adicionado proteína C ativada.
O alelo G20210A da protrombina leva ao aumento dos níveis plasmáticos de fibrinogênio.
A deficiência da antitrombina gera um aumento no tempo de protrombina (TAP).
A produção pela indústria farmacêutica nacional de medicamento genérico é uma política que visa apoiar o acesso à saúde da população brasileira. Um dos ensaios laboratoriais utilizado para comprovar a equivalência farmacêutica entre o medicamento genérico e o de marca é conhecido como teste de:
biocinética
bioequivalência
verossimilhança
farmacodinâmica
Diante do exposto, em análise restrita aos dados clínicos apresentados, verifica-se que o paciente G.T.N. pode responder aos medicamentos de uma maneira diferente. A resposta individual dele pode ser afetada por muitos fatores explicitados no enunciado, incluindo:
composição genética, uso de álcool, presença de doenças crônicas, idade e uso de outros fármacos.
farmacogenética, armazenamento do medicamento, desenvolvimento de tolerância, idade avançada.
resistência aos medicamentos, composição genética, presença de outras doenças e idade avançada.
uso de outras substâncias e suplementos alimentares, adesão medicamentosa, antagonismo farmacológico.
uso de suplementos alimentares, idade avançada, consumo de etanol e sobreposição de classe terapêutica.
Qual dos seguintes marcadores moleculares é predominante e tem significado prognóstico na Leucemia Mieloide Crônica (LMC) e é utilizado para monitorar a resposta ao tratamento?
CD19 e CD20.
Translocação t(15;17).
Cromossomo Filadélfia e translocação t(9;22)(q34;q11).
Mutação JAK2 V617F.
Deleção 5q.
Sobre resistência, numere a segunda coluna de acordo com a primeira, relacionando os fenótipos de resistência com os genes que a codificam.
(1) Resistência à vancomicina e sensibilidade à teicoplanina em Enterococcus faecalis e Enterococcus faecium.
(2) Resistência aos macrolídeos em Staphylococcus spp.
(3) Resistência à oxacilina em Staphylococcus spp.
(4) Resistência aos carbapenêmicos em Enterobacterales.
( ) Gene msr(A)
( ) Gene blaOXA-48
( ) Gene vanB
( ) Gene mecA
A sequência correta de preenchimento dos parênteses, de cima para baixo, é
1 – 2 – 3 – 4.
1 – 3 – 4 – 2.
2 – 1 – 4 – 3.
2 – 4 – 1 – 3.
4 – 3 – 1 – 2.
O estudo molecular da doença de Alzheimer permite a identificação de fatores genéticos de risco para o desenvolvimento de tal condição clínica. Assim, por meio do método da reação da polimerase em cadeia (PCR) em tempo real, é possível identificar o polimorfismo do gene da
Apo-A, com a detecção de três alelos, sendo o e3 o fator de risco genético mais comum associado ao Alzheimer de início tardio.
Apo-E, com a detecção de três alelos, sendo o e4 o fator de risco genético mais comum associado ao Alzheimer de início tardio.
Apo-A, com a detecção de três alelos, sendo o e4 o fator de risco genético mais comum associado ao Alzheimer de início tardio.
Apo-E, com a detecção de três alelos, sendo o e3 o fator de risco genético mais comum associado ao Alzheimer de início tardio.
A fenilcetonúria é uma condição clínica, que pode ser detectada, precocemente, nos primeiros dias de vida, por meio do teste do pezinho. Essa condição clínica é congênita e genética, associada ao distúrbio na conversão de fenilalanina em tirosina, realizada pela enzima humana:
fenilalanina desaminase
fenilalanina hidroxilase
fenilalanina oxidase
tirosina sintetase
tirosina oxidase
Analise as afirmativas a seguir:
I. O câncer surge como resultado de uma série de alterações genéticas e epigenéticas. As principais lesões são: ativação de genes de supressão tumoral e inativação de oncogenes (mutação dos genes normais que controlam a divisão celular e outros processos).
II. Todos os agentes alquilantes deprimem a função da medula óssea e causam perda de cabelo e transtornos gastrointestinais.
Marque a alternativa CORRETA:
As duas afirmativas são verdadeiras.
A afirmativa I é verdadeira, e a II é falsa.
A afirmativa II é verdadeira, e a I é falsa.
As duas afirmativas são falsas.
Durante um experimento, um pesquisador introduziu um plasmídeo contendo um gene de resistência a antibióticos em uma cepa bacteriana sensível. Após a introdução do plasmídeo, algumas bactérias expressaram resistência ao antibiótico, enquanto outras não. Marque os possíveis mecanismos genéticos que podem explicar essa variabilidade na expressão do gene de resistência.
Algumas bactérias perderam o plasmídeo durante a replicação celular, enquanto outras mantiveram a integridade do plasmídeo.
Mutações no gene de resistência ocorreram aleatoriamente, levando-a os diferentes níveis de expressão entre as bactérias.
O plasmídeo sofreu rearranjos genéticos, resultando em cópias com diferentes capacidades de expressão do gene de resistência.
O gene de resistência foi epigeneticamente modificado em algumas bactérias, resultando em variações na expressão gênica.
Variações na taxa de replicação do plasmídeo explicam as diferenças na expressão do gene de resistência entre as bactérias.
Assinale a alternativa que indique o tipo de material genético que o vírus da dengue possui.
DNA de fita dupla.
DNA de fita simples.
Genoma.
RNA.
Assinale a alternativa correta em relação às indicações para a utilização da citometria de fluxo no cenário clínico.
Na citometria de fluxo, a identificação de blastos da linhagem da célula T consiste na demonstração da expressão de antígenos CD45.
A leucemia linfocítica crônica/linfoma linfocítico pequeno (LLC/LLP) é caracterizada pela coexpressão, nas células B anormais, de CD20 com pequena expressão de cadeias leves e a presença do antígeno de ativação CD23.
Entre os linfomas de células B, o receptor de IL-2 é expresso na maioria dos casos de linfoma folicular, em um subgrupo significativo de linfomas de células B grandes e no linfoma de Burkitt.
A expressão de CD33 é detectada na grande maioria das LMA (Leucemias mieloides agudas) e, por isso, o anticorpo usado terapeuticamente é dirigido contra esse antígeno.
O papel da imunofenotipagem na classificação de linfomas de célula T não é bem definido, pois a maioria das células apresenta CD8+, perda ou diminuição da expressão de CD2, além da expressão anormal de CD10.
A PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) é uma técnica da biologia molecular, que multiplica um trecho específico do DNA, utilizando nucleotídeos como monômeros até um ponto em que sua concentração, em dada solução, seja tão alta que possa ser facilmente detectável. A multiplicação destes trechos específicos se dá alternando-se a temperatura de ensaio entre a desnaturação das cadeias do DNA, anelamento dos primers e amplificação. Assinale a alternativa que indica o nome do equipamento utilizado na PCR para ciclagem de temperatura e amplificação.
Termociclador.
Autoclave.
Banho Maria.
Extrator de material genético.
A técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é aplicada em diversos procedimentos laboratoriais e utilizada como o método de escolha no diagnóstico e caracterização molecular de diversos agentes patogênicos. Considerando aos princípios e etapas da PCR, avalie as seguintes asserções e a relação proposta entre elas.
I. A obtenção do resultado é mais rápida na PCR convencional do que na PCR em tempo real, pois apenas na convencional há a necessidade de se adicionar os primers.
PORQUE
II. As amostras passam pelas seguintes etapas durante cada ciclo da PCR: desnaturação do DNA molde, hibridização dos primers às suas sequências complementares, e extensão dos primers hibridizados pela DNA polimerase.
A respeito dessas asserções, assinale a opção correta.
As asserções I e II são proposições falsas.
As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa correta da I.
As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa correta da I.
A asserção I é uma proposição verdadeira, e a II é uma proposição falsa.
A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
A reação em cadeia da polimerase (PCR)
depende da atividade de cópia de fragmentos de DNA catalisada pela enzima DNA sintetase.
usa iniciadores, que são pequenos fragmentos sintéticos de DNA de fita dupla, complementares à sequência do segmento de DNA de interesse.
é realizada em equipamento chamado transiluminador, que possibilita ciclos de oscilação de temperaturas específicas.
resulta na produção de milhares de cópias dos fragmentos de DNA de interesse, chamados de amplicons.
A mutação é uma alteração súbita do material genético que é transmitida à descendência. Assinale a alternativa que define corretamente os tipos de mutação.
A transversão é o tipo mais comum de mutação pontual de substituição de base.
A despurinação leva à transição da adenina para hipoxantina e da citosina para uracila, formas anômalas de DNA que são eliminadas pelo sistema de reparo.
A transição é uma mutação pontual por substituição de base em que uma purina é substituída por outra ou uma pirimidina é substituída por outra.
O tautomerismo é uma isomeria química que ocorre com as bases purínicas em decorrência de flutuações térmicas que quebram as ligações N-glicosila com a desoxirribose.
Mutação com troca de sentido (missense) gera o aparecimento de um códon que sinaliza a finalização da transcrição, resultando no aparecimento de polipeptídeos não funcionais.
A informação contida nas sequências de nucleotídeos das moléculas de DNA (ácido desoxirribonucleico) e RNA (ácido ribonucleico) é tão rica, que possibilita diagnosticar uma doença genética e diferenciar cepas de micro-organismos patogênicos. Considere as principais etapas de extração de ácidos nucleicos evidenciados a seguir e assinale afirmativa correta.
1.Lise celular ➨ 2. Purificação ➨ 3. Precipitação DNA ➨ 4. Lavagem ➨ 5. Ressuspensão
A etapa de ressuspensão do DNA deve ser realizada, preferencialmente, em etanol ou clorofórmio.
A lavagem do DNA é realizada com água deionizada para a remoção dos sais, detergentes e de outras impurezas
Em condições de baixa temperatura e elevada concentração salina, a adição de etanol absoluto, isopropanol, ou soluções de acetato de amônio, ou sódio resulta na precipitação do DNA.
A lise celular envolve o rompimento das células. Deve-se evitar o uso de soluções tamponadas, ou que apresentem cisplatina, cloreto de sódio e EDTA (ácido etilenodiamino tetra-acético).
O reagente tris-hidroximetil aminometano (etapa de lise celular) mantém o pH da solução próximo a 8, favorecendo que o DNA, ao ser liberado, sofra o ataque das enzimas que o degradam.