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A ureia é o maior produto final do catabolismo das proteinas, sendo a forma de eliminação de, aproximadamente, 75% de todo o nitrogênio produzido pelo organismo. Um esquema simplificado desse metabolismo é assim representado:

Nesse contexto, as metodologias para a medição da ureia podem ser classificadas como químicas e enzimáticas. O método enzimático é considerado o de referência e tem sido utilizado na maioria das plataformas automatizadas.
Segundo Henry (2012), os métodos enzimáticos de detecção da ureia são baseados na:
hidrólise inicial da ureia pela urease, resultando na produção de amônia e CO2. O CO2 é o elemento mais comumente quantificado na maioria dos métodos enzimáticos.
reação da ureia com diacetilmonoxima, após ação da urease, sob condições fortemente acídicas, dando origem a um produto amarelado.
reação da amônia (produzida pela hidrólise) com N-metil-hidantoina para render glutamato e NAD+. O consumo de NADH indica a concentração de ureia.
hidrólise inicial da ureia pela urease, resultando na produção de amônia e CO2. O íon amônio é o elemento mais comumente quantificado na maioria dos métodos enzimáticos.
produção e quantificação de peróxido de hidrogênio após reação de hidrólise, servindo de estimativa indireta da concentração de ureia.