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A mão de obra, na região amazônica, era indígena e recrutada pelos jesuítas, que foram responsáveis pela fundação de dezenas de missões na Bacia do Rio Amazonas. Nesse sentido, a ocupação religiosa da região foi de extrema importância para garantir, no século XVIII, a expansão das fronteiras luso-brasileiras para além do Tratado de Tordesilhas, reconhecidas por meio do Tratado de Madri de 1750.
Pode-se, então, destacar a:
criação do Forte Nossa Senhora de Assunção que dará origem à cidade de Manaus.
fundação da localidade de Aldeias Altas para apoiara colonização na região amazônica.
fundação do Forte de São Gabriel de Cachoeira, no litoral da cidade de São Luis.
criação do Forte São José do Rio Negro, onde hoje se localiza a cidade de Manaus.