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Diafanização é a substituição do álcool, após a desidratação, por um outro produto com o qual a parafina tenha afinidade.
Em relação à diafanização, é correto afirmar que
os diafanizadores são solúveis em água e insolúveis em álcool, portanto, têm densidade maior que a da água.
na etapa de diafanização não é possível verificar se a desidratação apresentou um bom rendimento.
é aconselhável a troca constante do diafanizador.
diafanização é uma etapa com a mesma função da desidratação.
os diafanizadores mais conhecidos são xilol, toluol, benzeno, óleo de cedro e os solventes universais acetato butílico, dióxido dietileno e benzoato metílico.
Entre os instrumentos utilizados no laboratório, destacam-se as navalhas para os cortes de tecidos.
Em relação a essas navalhas, assinale a afirmativa correta.
Navalhas de aço podem ser revestidas por substâncias anticorrosivas para preservar sua função.
Navalhas descartáveis não são indicadas para confecção de cortes incluídos em parafina.
A navalha não está sendo mais utilizada para os cortes de tecidos.
Navalhas descartáveis não necessitam de afiadores automáticos.
Navalhas de aço para criostato são mais frágeis e totalmente livres de impurezas.
Ao ser analisado ao microscópio óptico após fixação e coloração com corantes básicos, o núcleo celular revela a presença de grânulos de tamanho e forma irregulares, que se coram intensamente. Esse material nuclear é denominado cromatina e está diretamente relacionado à atividade genética da célula. A partir disso, assinale a alternativa que apresenta corretamente a constituição da cromatina.
Ácido ribonucleico (RNA) associado a fosfolipídios e enzimas.
Cadeias de aminoácidos ligadas a ácidos graxos e RNA mensageiro.
Proteínas estruturais associadas a polissacarídeos e lipídeos.
Conjunto de ribossomos e proteínas de membrana nuclear.
Ácido desoxirribonucleico (DNA) associado a proteínas.
Sobre o processo de fixação histológica, assinale a alternativa INCORRETA.
A fixação é uma das etapas mais importantes da técnica histológica, pois visa interromper o metabolismo celular, estabilizando as estruturas e os componentes bioquímicos intra e extracelulares, preservando e conservando os elementos teciduais, além de permitir a penetração de outras substâncias subsequentes à fixação.
Os fixadores aldeídos comumente utilizados são o formaldeído, o metanol e o glutaraldeído, que é o próprio formaldeído na sua forma pura polimerizada. Esses fixadores formam ligações cruzadas com as proteínas tissulares, tornando-as solúveis em forma de um gel.
Quando o formaldeído é exposto à luz, isto é, ao oxigênio atmosférico e tecidual, ocorre a oxidação do formaldeído, formando ácido fórmico.
Ao manipular formaldeído, ou soluções contendo essa substância, deve-se fazer uso de luvas, máscara com filtro próprio para vapores orgânicos, em local arejado e com exaustão. O preparo de soluções fixadoras deve ser feito em capela de exaustão.
Vários são os fatores que influenciam no processo da fixação, interferindo diretamente na preservação tecidual e, em última instância, no tecido que se deseja observar. Alguns desses fatores são: temperatura, espessura do tecido, tempo de fixação, escolha do fixador e relação entre volume do fixador e tamanho do espécime.
A solicitação de coloração especial, ou específica, é um procedimento feito pelo patologista ou pesquisador sempre que a lâmina corada por Hematoxilina e Eosina (H&E) não for suficiente para diagnóstico ou para mostrar estruturas que necessitam ser melhor esclarecidas. A partir disso, assinale a alternativa a seguir que apresenta apenas métodos de colorações histológicas que podem ser utilizadas para grânulos, depósitos e pigmentos intracelulares.
Vermelho-congo, PAS sem digestão, Sudan e Fouchet.
Retículo, Van Kossa, Fouchet e Perl’s.
Vermelho-congo, Perl’s, Warthin-Starry e Bielschowsky.
Sudan, Bielschowsky, Fontana Masson e Gram.
Fouchet, retículo, Warthin-Starry e Perl’s.
A montagem, parte da etapa de finalização da técnica histológica, é muito importante, pois implica na proteção do esfregaço, evitando dessecação e descoloração do corte já corado.
Acerca do assunto, é correto afirmar que
as resinas sintéticas são muito utilizadas nos laboratórios de histologia, por secarem rapidamente, mas é preciso realizar o processo de desidratação devido à incompatibilidade com a água.
após a coloração do material, a lamínula é colocada sobre o corte e, posteriormente, a resina é dispensada para proteção do material.
o Entellan® é um dos meios de montagem acrílico com a característica de interferir na cor da amostra, mas não alterar a visualização no microscópio; como meio de montagem natural podemos citar o bálsamo do Canadá, que possui a desvantagem de secar lentamente.
o processo de montagem é uma das fases iniciais dos exames histológicos.
as bolhas provocadas durante a selagem da lamínula não causam distorção na visualização da imagem no microscópio.
O símbolo de risco químico é utilizado em laboratórios que utilizam formol e xilol. Esses reagentes são usuais nas rotinas de histologia laboratorial.
Sobre esse símbolo, é correto afirmar que
deve ser utilizado apenas em recipientes tóxicos e inflamáveis independentemente do local onde são armazenados.
é obrigatório que esteja presente não só nos frascos, mas também em locais de armazenamento em áreas de trabalho.
o uso do símbolo é opcional, ficando livre a critério do laboratório.
deve ser utilizado apenas em casos nos quais a quantidade de reagente é maior que os limites da Anvisa.
é facultativo seu uso, pois formol e xilol não são tóxicos para a saúde.
Durante as etapas do procedimento de exames histológicos podem ocorrer fatores que interferem na qualidade das etapas realizadas.
Em relação ao tema, avalie se as afirmativas a seguir estão corretas.
I. O uso de diversos tipos de navalhas não mantém um padrão de corte no laboratório.
II. O tempo de imersão das lâminas em corante interfere na qualidade de leitura.
III. O uso de mordente impacta a qualidade da coloração.
Está correto apenas o que se afirma em
I.
I e II.
II.
II e III.
III.
O descarte de resíduos biológicos em laboratórios de histologia é um assunto sempre explorado e envolve a necessidade de inspeções periódicas.
Em relação a esse assunto, é correto afirmar que
resíduos biológicos devem ser descartados em recipientes apropriados, identificados como resíduos infectantes, e encaminhados para tratamento por autoclave ou incineração.
todo material biológico deve ser incinerado, independentemente de tratamento prévio ou de regulamentação local.
materiais biológicos fixados com formalina podem ser descartados diretamente no esgoto, desde que diluídos adequadamente.
os resíduos biológicos podem ser descartados no lixo comum.
resíduos biológicos devem ser descartados em sacos plásticos pretos no descarpack perfurocortante.
Durante o estudo da patologia celular, compreende-se que a lesão celular pode resultar de diversos estímulos nocivos, como toxinas, isquemia e radiações. A resposta da célula a esses estímulos depende de fatores como tipo, intensidade e duração da lesão, bem como das características próprias da célula afetada, como seu estado metabólico e capacidade de adaptação. A lesão celular pode ser reversível ou irreversível, e está relacionada a mecanismos bioquímicos que afetam estruturas e funções essenciais da célula. Com base nisso, assinale a alternativa que apresenta corretamente alguns dos principais mecanismos bioquímicos envolvidos na lesão celular.
Lesão ao citoesqueleto, estímulo hormonal excessivo, aumento da proliferação celular, deleção de ATP e formação de corpos apoptóticos.
Aumento da produção de energia, disfunção mitocondrial, perda da integridade das membranas celulares, produção de anticorpos e lise lisossomal.
Ativação de linfócitos T, produção de anticorpos, liberação de histamina e fagocitose de patógenos intracelulares.
Deleção de ATP, danos mitocondriais, influxo de cálcio e perda da homeostasia do cálcio, estresse oxidativo, defeitos na permeabilidade da membrana e danos ao DNA e às proteínas.
Perda da homeostase do cálcio, danos mitocondriais, diferenciação celular anormal, aumento da produção de energia e lise do núcleo.
Em relação aos métodos de coloração utilizados para a identificação de agentes etiológicos em amostras clínicas, analise as assertivas a seguir e assinale V, se verdadeiras, ou F, se falsas. ( ) A coloração de Gram é utilizada para a classificação de bactérias, resultando em coloração roxa para bactérias Gram-positivas e rosa para as Gram-negativas.
( ) O método de Ziehl-Neelsen é utilizado para a identificação de fungos, que aparecem corados em preto.
( ) A coloração de Fite-Faraco é empregada para detectar a bactéria causadora da lepra, de forma que os bacilos de lepra tornam-se vermelhos depois de corados.
( ) O método prata metenamina de Gomori (GMS) é utilizado para identificar a bactéria da tuberculose, com os Bacilos Álcool-ácido Resistentes (BAAR) aparecendo em vermelho brilhante.
A ordem correta de preenchimento dos parênteses, de cima para baixo, é:
V – F – V – F.
F – V – V – F.
V – F – V – V.
F – V – F – V.
F – F – F – V.
A inflamação é uma resposta fisiológica do organismo a agressões como infecções, traumas ou lesões teciduais. Pode ser classificada em aguda, quando apresenta início rápido e curta duração, ou crônica, quando persiste por vários dias, meses ou anos. Considerando as características dos diferentes tipos de inflamação, analise as assertivas a seguir e assinale V, se verdadeiras, ou F, se falsas.
( ) A resposta imunológica na condição aguda é mediada pela imunidade inata através de células fagocitárias (macrófagos e neutrófilos).
( ) Os principais sinais da resposta inflamatória crônica estão representados pelos sintomas clássicos como rubor, calor, dor e edema.
( ) A inflamação crônica é caracterizada pela ativação imune persistente com presença dominante de macrófagos no tecido lesionado.
( ) A resposta imunológica da inflamação crônica é mediada pela imunidade adquirida através dos linfócitos na produção de anticorpos.
A ordem correta de preenchimento dos parênteses, de cima para baixo, é:
V – V – V – V.
F – V – F – F.
V – F – F – V.
V – F – V – V.
F – V – V – F.
Em citologia, as amostras analisadas podem ser provenientes de diferentes regiões do corpo e apresentar variadas consistências físicas, como líquida, pastosa ou sólida. A natureza da amostra influencia diretamente o método de coleta adotado e a técnica laboratorial empregada para o preparo da lâmina citológica. Considerando a relação entre o tipo de amostra, o método de coleta e a sua origem anatômica, assinale a alternativa que apresenta um exemplo de sequência correta desses três elementos, respectivamente.
Distenção celular (esfregaço) – escovação – lavado brônquico.
Amostra pastosa – expectoração – líquido pleural.
Amostra líquida – punção – líquido estomacal.
Distenção celular – escovação ou lavado – massas necróticas.
Amostra líquida – raspagem swab – abcesso.
Durante a análise histológica de tecidos mineralizados, é necessário empregar técnicas específicas que possibilitem a visualização adequada de seus constituintes orgânicos e inorgânicos. O tecido ósseo, por exemplo, é uma especialização do tecido conjuntivo, caracterizado por sua rigidez e inflexibilidade devido à presença de cristais de hidroxiapatita em sua matriz extracelular. São procedimentos técnicos que podem auxiliar no estudo do tecido ósseo em microscopia de luz:
A descalcificação, que remove a porção mineral e analisa somente os constituintes orgânicos do tecido ósseo; e o desgaste, que permite analisar os componentes inorgânicos do tecido.
A clarificação, que visa remover completamente a coloração do interior do tecido; e a desidratação, que visa remover o excesso de água, evidenciando os sais minerais.
A calcificação, que possibilita a obtenção dos sais de cálcio amolecendo o tecido ósseo; e a clarificação, que visa remover completamente a coloração do interior do tecido.
O desgaste, que remove o fosfato e permite analisar os componentes orgânicos do tecido; e a descalcificação, que remove o cálcio e permite analisar os constituintes inorgânicos do tecido.
A calcificação, que evidencia a porção mineral e analisa somente os constituintes orgânicos do tecido ósseo; e o desgaste, que permite analisar os componentes inorgânicos do tecido.
Com os avanços tecnológicos introduzidos nos exames diagnósticos de várias doenças, a técnica de histologia continua sendo a melhor opção para o diagnóstico de toxicidade, disfunções em geral e rejeições nos transplantes. A fixação é uma etapa importante quando são empregadas as técnicas de histologia. Em relação à fixação, é correto afirmar que
sua função é preservar a morfologia celular e a composição química das células após a sua retirada do organismo.
os fixadores utilizados para os exames histológicos não causam nenhum tipo de mudança no material biológico, esse avanço é resultado do emprego da tecnologia aplicada nos procedimentos laboratoriais.
o fixador impede a interação do material biológico com o corante evitando resultados não esperados nas leituras microscópicas.
na fixação de cobertura, um agente coagulante penetra na célula desidratando-a e intensificando a diferenciação nuclear e citoplasmática após o processo de coloração.
os fixadores têm funções tais como prevenir ou inibir a autólise, mas não têm capacidade de coagular e tornar difusíveis as substâncias insolúveis.
A lesão celular ocorre quando uma célula é submetida a estímulos agressivos ou sofre anomalias intrínsecas que comprometem sua capacidade de adaptação. Essa lesão pode ser reversível em um primeiro momento, mas, se persistente ou intensa, pode evoluir para a morte celular. Quando o dano às membranas é acentuado, por exemplo, as enzimas lisossômicas extravasam para o citoplasma, digerem a célula, e o conteúdo celular escapa, resultando em um tipo específico de morte celular. O trecho refere-se a qual tipo de morte celular?
Hipoxia.
Apoptose.
Autofagia.
Necrose.
Senescência.
O tecido muscular é formado por células alongadas ricas em proteínas contráteis, capazes de converter energia química (ATP) em energia mecânica, permitindo a contração celular e muscular. Em relação ao tecido muscular, analise as assertivas a seguir:
I. A contração do tecido muscular promove o movimento de estruturas ligadas a ele, como os ossos, e, consequentemente, do corpo. Permite ainda o movimento, pelo organismo, de substâncias e líquidos, como o alimento, o sangue e a linfa.
II. As células do músculo estriado esquelético possuem filamentos de actina e de miosina em abundância, e a sua organização faz com que se observem estriações transversais ao microscópio de luz, o que conferiu o nome estriado ao tecido.
III. O músculo estriado cardíaco apresenta contração involuntária. Nele, há células especializadas na geração e condução do estímulo cardíaco, conectadas por junções comunicantes.
IV. No músculo liso, a disposição dos feixes de filamentos contráteis em diferentes planos faz com que as células não apresentem estriações. A contração desse músculo é involuntária e lenta, controlada pelo sistema nervoso autônomo.
Quais estão corretas?
Apenas I e IV.
Apenas II e III.
Apenas I, II e III.
Apenas II, III e IV.
I, II, III e IV.
O processamento histológico para o preparo de amostras histológicas consiste na difusão de reagentes químicos para o interior dos tecidos e na remoção do líquido tecidual. Esse processo torna rígidos os fragmentos dos tecidos, facilitando a obtenção de cortes finos para a observação ao microscópio. Entre as etapas do processamento de rotina, estão desidratação, diafanização, impregnação e inclusão. Em relação a essas etapas do processamento histológico, analise as assertivas a seguir:
I. Desidratação: tem como objetivo retirar a água presente no tecido, visto que a parafina é solúvel em água. A propanona é o produto mais utilizado para esse fim. O processo de desidratação é realizado de forma regressiva quanto à graduação da propanona.
II. Diafanização ou clarificação: tem a finalidade de remover completamente o álcool do interior dos tecidos, visto que a parafina não se mistura homogeneamente com o álcool. Dessa forma, é necessário substituir o álcool por um produto com o qual a parafina tenha afinidade.
III. Impregnação: consiste na infiltração da parafina líquida no material biológico para que o tecido adquira rigidez suficiente e seja possível a realização de cortes finos. O objetivo dessa etapa é eliminar completamente o solvente (geralmente o xilol) contido na peça e a total penetração da parafina nos espaços deixados pela água e pela gordura, antes existentes no tecido.
IV. Inclusão: seu objetivo é envolver o exterior do material biológico com a parafina líquida para formar blocos que serão submetidos posteriormente à microtomia.
Quais estão corretas?
Apenas I e II.
Apenas III e IV.
Apenas I, II e III.
Apenas II, III e IV.
I, II, III e IV.
Considere as seguintes situações relacionadas à manipulação de agentes biológicos em laboratórios:
I. Estudos com a bactéria Eschericha coli enterohemorrágica.
II. Cultivo em cultura de Lactobacillus spp. para desenvolvimento de probióticos.
III. Isolamento do vírus Ebola em amostras humanas.
Conforme a Portaria nº 1608/2007, essas situações associam-se, respectivamente, aos riscos
3 – 1 – 4.
1 – 2 – 3.
3 – 2 – 1.
2 – 3 – 4.
2 – 1 – 4.
A fixação é realizada logo após a coleta da amostra, podendo ser aplicado o método químico ou físico.
Em relação a esses dois métodos, assinale a afirmativa correta.
No método físico, a amostra coletada é imediatamente congelada em freezer.
O método químico necessita do emprego de fixadores.
O método físico normalmente utiliza fixadores simples.
O método físico é utilizado apenas para tecidos coletados após a morte animal ou humana.
O método químico é empregado apenas em peças de tamanho grande logo após a coleta.