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O desenvolvimento da reação em cadeia da polimerase (PCR...
O desenvolvimento da reação em cadeia da polimerase (PCR, polymerase chain reaction) foi um marco na biotecnologia, que anunciou o nascimento do diagnóstico molecular. Segundo McPherson e Pincus (2012), sobre a técnica da PCR, é INCORRETO afirmar que:
A
embora a PCR seja o método de amplificação de ácidos nucleicos mais desenvolvido e amplamente utilizado, existem outros métodos com aplicação diagnóstica.
B
um ciclo de PCR consiste em 3 etapas: desnaturação, anelamento e extensão. Ao final de cada ciclo, os produtos da PCR devem, teoricamente, ter sido duplicados. Assim, após n ciclos de PCR, a sequência alvo pode ser amplificada 2n vezes.
C
a PCR utilizando transcriptase reversa (RT-PCR) foi desenvolvida para amplificar alvos de RNA.
D
a principal vantagem da nested-PCR é a baixa taxa de contaminação na etapa da segunda rodada de amplificação.
E
os métodos de PCR em tempo real são bastante úteis para aplicações quantitativas, uma vez que a análise é menos propensa aos erros que podem resultar das diferenças de eficácia da amplificação entre as amostras.