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Em relação à coloração pelo método de Gram, podemos afirmar que:
o controle de qualidade da coloração de bactérias gram-positivas pode ser realizado por cepa isolada de Escherichia coli.
a fixação da amostra biológica pelo calor, etapa prévia da coloração, deve ser realizada à temperatura em torno de 80º C.
as bactérias gram-negativas não são afetadas pela descoloração com álcool-acetona, sendo que são visualizadas no microscópio em azul-escuro.
se a amostra for muito espessa, recomenda-se a diluição com água destilada antes de realizar o esfregaço.
nas amostras recebidas em frascos ou tubos estéreis, recomenda-se selecionar a parte mais purulenta e confeccionar o esfregaço, espalhando-a em ¾ da lâmina.