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Dentre os métodos moleculares mais utilizados na rotina laboratorial, a PCR (reação em ...

Dentre os métodos moleculares mais utilizados na rotina laboratorial, a PCR (reação em cadeia de polimerase) tem ganhado destaque.


Sobre a técnica de PCR e suas variações, assinale com V as afirmativas verdadeiras e com F as falsas.


( ) A PCR convencional consiste em um método de amplificação de um fragmento de DNA específico. Essa especificidade é conferida ao teste pela utilização de iniciadores que devem reconhecer apenas o DNA do microrganismo pesquisado, não se ligando ao DNA humano, também presente na amostra. Ao término dos ciclos de PCR, o fragmento amplificado deve ser identificado por eletroforese em gel de agarose ou de poliacrilamida.

( ) A RT-PCR é uma variação da PCR convencional. Nessa técnica, moléculas de RNA são convertidas a cDNA por uma enzima chamada de transcriptase reversa. As moléculas de cDNA assim produzidas são submetidas aos ciclos de amplificação da PCR. O cDNA, apesar de produzido a partir de um RNA, é igual ao DNA gênomico.

( ) A PCRq é outra variação da PCR convencional. Nessa técnica, o processo de amplificação do fragmento de DNA alvo é visualidade em tempo real pela emissão de fluorescência que é liberada a cada fita nova de DNA formada. Essa metodologia permite ensaios qualitativos e quantitativos.

( ) Existem duas estratégias para a emissão de fluorescência no teste PCRq: em uma se utiliza o corante SYBR green e em outra são utilizadas sondas fluorescentes. A primeira estratégia é mais específica que a segunda, pois o corante SYBR green é gene-específico, isto é, se liga apenas ao DNA alvo.


Assinale a sequência correta.


A

V F V F


B

F V F F


C

F F V V


D

V V F V