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O protocolo de preparação do meio de cultura RPMI-1640 deve seguir a tabela abaixo:
Preparo de 1L de meio RPMI - 1640

Para que o meio de cultura seja preparado de forma correta, apresentando qualidade que permita o crescimento celular e a manutenção da cultura é necessário
ferver a solução preparada com Hepes, Bicarbonato e RPMI-1640 para garantir a dissolução dos solutos.
realizar o preparo da solução em uma capela de fluxo laminar para evitar a contaminação dos reagentes.
filtrar a solução preparada após o ajuste de pH para garantir a esterilidade do meio de cultura.
utilizar água ultrapura na dissolução dos solutos para evitar que seja necessário esterilizar o meio de cultura.