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Um laboratório de diagnóstico molecular utiliza o Western blotting para validação de bi...
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Q4575859
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Um laboratório de diagnóstico molecular utiliza o Western blotting para validação de biomarcadores proteicos em doenças neurodegenerativas. Durante a padronização do método, observou-se variação significativa na intensidade das bandas, mesmo com quantidades aparentemente iguais de proteína carregada. Assinale a alternativa correta sobre os princípios técnicos e as limitações analíticas do Western blotting.
A
O uso de proteínas constitutivas como GAPDH elimina completamente variações técnicas, sendo superior à coloração total de proteínas.
B
A coloração total de proteínas (TPS) pode ser mais confiável que proteínas housekeeping, pois reflete melhor a carga total transferida.
C
A intensidade da banda depende exclusivamente da afinidade do anticorpo primário, sendo independente da quantidade de proteína.
D
O controle de carga é desnecessário quando se utiliza detecção por quimioluminescência.