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O laboratório de análises clínicas precisa se basear em evidências científicas, englobando parâmetros próprios para os ensaios. O valor de referência dos controles é um dos segmentos mais relevantes na análise laboratorial, visto que auxilia os profissionais na liberação de um resultado coerente para o futuro diagnóstico e tratamento do paciente. Levando em consideração o controle de qualidade laboratorial, assinale a alternativa INCORRETA.
A
São necessários manuais de Procedimentos Operacionais Padrão (POPs) abrangendo orientações e dados inerentes à rotina laboratorial.
B
Os POPs devem retratar minunciosamente as práticas laboratoriais, desde a fase pré-analítica até a pós-analítica, contendo explicações sobre o manejo correto dos equipamentos, precauções de biossegurança e detalhes dos processos técnicos.
C
Os POPs têm como objetivo a padronização das técnicas por parte de todos os envolvidos, assegurando a qualidade final do serviço prestado. Sendo assim, o uso adequado desses procedimentos diminui os erros e faz com que as ações arriscadas não se tornem rotineiras.
D
As amostras utilizadas como controle dispõem de valores preestabelecidos e sua supervisão é efetuada através de ensaios estatísticos, considerando valor de média, desvio-padrão e coeficiente de variação.
E
São utilizados os gráficos de Levey-Jennings e as regras múltiplas de Westgard para interpretação do controle de qualidade internamente em cada equipamento de análise. O limite aceitável de erro para cada analito é de mais de 3 desvios-padrões.
Quais são as principais vantagens da espectrometria de massas de alta resolução (HRMS) na análise de diferentes abordagens ômicas?
A
A HRMS é utilizada principalmente em análises proteômicas, pois as demais abordagens ômicas não requerem alta resolução para diferenciar biomoléculas em amostras biológicas complexas.
B
A metabolômica e a lipidômica utilizam espectrometria de massas de baixa resolução, pois a diferenciação de metabólitos e lipídeos pode ser realizada apenas com base no tempo de retenção cromatográfico.
C
A espectrometria de massas de alta resolução não é adequada para análises ômicas, pois exige tempos de aquisição muito longos, limitando sua aplicabilidade na identificação de biomoléculas.
D
A HRMS não contribui significativamente para a identificação estrutural de biomoléculas, sendo utilizada apenas para quantificação relativa de metabólitos e proteínas em amostras biológicas.
E
A HRMS permite a identificação precisa de biomoléculas em proteômica, metabolômica e lipidômica, diferenciando compostos isobáricos e fornecendo massa exata para elucidação estrutural.
Um dos métodos de coloração de amostra suspeita infectada com o agente etiológico da tuberculose pulmonar é conhecida como Ziehl-Neelsen. Nesse método, após o emprego da preparação em análise com fucsina fenicada e da mistura álcool-ácido, adiciona-se o corante:
A
hematoxilina férrica
B
laranja de metila
C
azul de metileno
D
verde malaquita
O controle da qualidade é a forma de monitoramento pela análise de amostras controle, de modo a acompanhar os resultados para definição da precisão e exatidão do processo analítico. Quando o controle de qualidade se encontra comprometido, medidas devem ser tomadas. Qual é o nome dado ao procedimento que se refere a um conjunto de operações sob condições especificadas, que estabelece a correspondência entre os valores indicados por um instrumento de medida e um material de referência, com fins de padronização ou ajuste de instrumentos ou de procedimentos, conforme a RDC nº 786/2023?
A
Controle de qualidade interno.
B
Controle de qualidade externo.
C
Calibração.
D
Validação.
E
Analito.
Os espectrômetros de massas operam em várias etapas para analisar os íons gerados a partir de uma amostra. Qual das alternativas a seguir descreve uma dessas etapas?
A
O espectrômetro de massas produz íons a partir de amostras líquidas diretamente no detector em alto vácuo.
B
Os íons da amostra carregados positivamente ou negativamente são separados com base na conformação espacial no analisador de massas.
C
Em espectrômetros de massas do tipo tandem, os íons selecionados no quadrupolo são fragmentados em uma célula de colisão, e os fragmentos resultantes são analisados em um segundo analisador.
D
O detector é responsável por separar os íons com base em sua razão massa/carga (m/z), convertendo os sinais elétricos em abundância relativa.
E
Os sinais elétricos provenientes dos íons detectados no analisador de massas são transmitidos para o computador para gerar o espectro de massas.
Na Bioinformática, a manipulação e a análise de grandes volumes de dados exigem ferramentas eficientes e bem estruturadas. No R, pacotes como Bioconductor fornecem funcionalidades específicas para análise de dados ômicos, enquanto o Tidyverse facilita a manipulação de tabelas. No Python, bibliotecas como Pandas e NumPy permitem a manipulação de DataFrames e arrays de forma otimizada, essenciais para explorar e processar conjuntos de dados biológicos. Além disso, a escolha de boas práticas e ferramentas impacta diretamente a eficiência, transparência e reprodutibilidade das análises. Qual das alternativas a seguir representa corretamente uma vantagem do uso de Pandas e NumPy na manipulação de dados biológicos?
A
O Pandas permite manipular dados apenas em pequenos conjuntos, tornando-se ineficiente para grandes volumes de informações biológicas.
B
O Pandas oferece estruturas como DataFrames, permitindo manipular grandes conjuntos de dados biológicos de maneira eficiente, enquanto o NumPy fornece operações vetorizadas para cálculos matemáticos otimizados.
C
O NumPy substitui completamente o Pandas em todas as análises biológicas, pois sua estrutura de arrays multidimensionais é suficiente para qualquer tipo de manipulação de dados.
D
O Pandas realiza todas as operações matemáticas automaticamente, dispensando a necessidade de manipular arrays ou aplicar métodos estatísticos adicionais.
E
O NumPy e o Pandas foram desenvolvidos exclusivamente para aplicações bioinformáticas, não sendo amplamente utilizados em outras áreas da ciência de dados.
Boas práticas de laboratório são um conjunto de ações com o objetivo de proporcionar a diminuição dos riscos do ambiente laboratorial. Levando em consideração higiene e boas práticas, assinale a alternativa correta.
A
É permitido armazenar bebidas e alimentos de consumo próprio nas geladeiras do laboratório utilizadas para preservação de amostras biológicas desde que estejam plastificados e devidamente identificados.
B
É permitido utilizar o celular e demais materiais pessoais nas bancadas de trabalho desde que contenham amostras de sangue ou urina sabidamente não infectadas por microrganismos patogênicos.
C
A higienização das mãos deve ser feita com frequência, antes de entrar ou sair do laboratório, antes e após o manuseio e descarte de produtos químicos, radioativos ou biológicos, e após a retirada das luvas.
D
O uso de adornos pessoais (brincos, colares, relógios) é recomendado na área de coleta de amostras, triagem e análise amostral, assim como o uso de maquiagem, para que se mantenha a boa aparência.
E
O uso de dispositivos de pipetagem automática são opcionais para transferir líquidos químicos de qualquer natureza ou amostras biológicas. A pipetagem com a boca é permitida após anos de experiência.
Sobre o preparo de amostras em proteômica bottom-up (identificação de proteínas baseado na digestão proteolítica das amostras), assinale a alternativa correta.
A
O protocolo de extração em fase sólida com colunas C18 após a digestão segue a ordem: 1) condicionamento da coluna, 2) adição da amostra, 3) lavagem com 100% solvente orgânico (acetonitrila ou metanol), e 4) eluição da amostra em solução aquosa acidificada.
B
A utilização de ditiotreitol (DTT), um agente redutor, tem o papel de prevenir a oxidação de aminoácidos suscetíveis, tais como a metionina.
C
A reprodutibilidade das análises depende de uma digestão completa, e, atualmente, a enzima tripsina (que perde sua atividade em pH<4) tem sido amplamente substituída pela pepsina, pois, nesse caso, a digestão já é realizada em pH ácido compatível com a posterior injeção no espectrômetro de massas dos peptídeos resultantes.
D
Desnaturantes caotrópicos, como a ureia, ou detergentes, como o dodecil-sulfato de sódio (SDS), são utilizados para solubilizar e desnaturar proteínas. A vantagem da utilização de ureia é que a enzima tripsina tolera altas concentrações (até 8 M) desse agente e, dessa forma, pode-se injetar o material digerido diretamente no espectrômetro de massas, evitando-se o passo adicional para remover detergentes.
E
Surfactantes estão comumente presentes nos tampões utilizados para a extração das proteínas dos tecidos, mas são incompatíveis com a análise por espectrometria de massas. Dispositivos como filtros de limite de peso molecular, filtros contendo membrana de borosilicato e micropartículas que imobilizam as proteínas por agregação têm sido utilizados para remover contaminantes indesejados.
Com relação aos métodos de ionização aplicados a biomoléculas, é correto afirmar:
A
No geral, íons Na+ precisam ser removidos das amostras, pois atrapalham a ionização por eletrospray. Entretanto, alguns métodos utilizam acetato de sódio para melhorar a ionização de lipídeos, carboidratos e outros compostos de difícil ionização, uma vez que esse sal favorece a formação de adutos de carga positiva, facilitando a detecção.
B
Para a ionização no modo negativo utilizando-se a técnica de eletrospray, uma mistura de solventes comumente empregada é tampão tris (Tris(hidroximetil)aminometano, 10 mM, pH 9, em água) e metanol, pois o tampão tris é básico e facilita a desprotonação, enquanto que o metanol auxilia na rápida evaporação para favorecer a ionização.
C
Na ionização no modo eletrospray, a sensibilidade da técnica pode ser aumentada ao se aumentar o diâmetro do capilar utilizado e o fluxo de solvente direcionado para o espectrômetro de massas.
D
Na ionização do tipo MALDI (ionização por dessorção a laser assistida por matriz), a amostra é irradiada com um laser de comprimento de onda na região do UV, que fornece a energia absorvida pela amostra, facilitando sua dessorção da matriz e ionização.
E
A ionização do tipo MALDI (ionização por dessorção a laser assistida por matriz) é muito utilizada para o rastreamento inicial de pequenos metabólitos (massa molecular < 300 Da) em amostras biológicas, pois permite a análise rápida de amostras contendo vários analitos sem separação cromatográfica.
O profissional que atua em um laboratório de análises clínicas precisa estar ciente sobre os riscos ocupacionais a que se expõe para que possa se proteger. Assinale a alternativa que relaciona corretamente o tipo de risco ao seu respectivo exemplo.
A
Risco físico – postura inadequada no momento da coleta sanguínea.
B
Risco químico – manipulação de autoclave.
C
Risco ergonômico – exposição a substâncias irritantes e nocivas.
D
Risco de acidente – colocar meio de cultura dentro da estufa.
E
Risco biológico – coleta de secreção vaginal sem luvas.
As agências transfusionais realizam diversos procedimentos laboratoriais para a realização de hemotransfusões seguras. No soro de pacientes devidamente classificados no sistema ABO sanguíneo, como AB e B, temos o seguinte perfil de aglutininas séricas:
A
nenhuma e Anti-A
B
nenhuma e Anti-B
C
Anti-O e anti-A
D
Anti-O e anti-B
No envelhecimento de vinhos tranquilos em barricas de carvalho, a extração de compostos da madeira influencia não apenas o perfil sensorial, mas também a estabilidade oxidativa. Assinale a alternativa mais precisa em relação a esse fenômeno.
A
A presença de lactonas da madeira contribui diretamente para o aumento da capacidade redox do vinho, reduzindo a produção de peróxidos.
B
Compostos fenólicos da madeira, como o ácido elágico, apresentam ação antioxidante direta e participam da formação de redes de condensação com taninos do vinho.
C
A extração de taninos hidrolisáveis da madeira reduz a reatividade dos taninos condensados do vinho, inibindo a formação de polímeros corantes.
D
O oxigênio permeado pela madeira gera superóxidos, que são neutralizados por aldeídos extraídos da tosta, mantendo o equilíbrio redox.
E
A presença de lignina residual nas barricas favorece a formação de aldeídos fenólicos que atuam como agentes protetores da acidez volátil do vinho.
Um Técnico em Laboratório recebe a tarefa de verificar a continuidade de um fio de conexão utilizado em um equipamento analítico sensível. Para isso, decide utilizar um ohmímetro digital. Assinale a alternativa correta que corresponde ao procedimento e interpretação para garantir a eficiência do teste.
A
Medir a corrente no fio com o ohmímetro em série, interpretar uma corrente alta como continuidade e uma corrente baixa como isolação eficaz.
B
Conectar as pontas de prova do ohmímetro às extremidades do fio sob tensão, interpretar uma leitura baixa como continuidade e uma leitura alta como resistência aceitável.
C
Ligar o ohmímetro diretamente no circuito energizado, interpretar uma leitura baixa como continuidade e uma leitura infinita como curto-circuito.
D
Conectar as pontas de prova do ohmímetro às extremidades do fio desenergizado, interpretar uma leitura próxima a zero ohms como continuidade e uma leitura muito alta como interrupção.
Considerando o processamento e análise de amostras de secreções para diagnosticar infecções bacterianas e virais, avalia as características e métodos envolvidos para garantir a qualidade do resultado, marque V para as afirmativas verdadeiras e F para as falsas.
(__) A técnica de Gram diferencia bactérias com parede espessa de peptidoglicano (Gram positivas) daquelas com parede mais fina e membrana externa (Gram negativas).
(__) Os vírus crescem facilmente em ágar nutriente simples, assim como as bactérias, não requerendo células para replicação.
(__) A autoclave a 121ºC por 30 minutos inativa a maioria dos microrganismos, mas não todos os vírus conhecidos, como o vírus da hepatite A, que requer métodos especiais de inativação química.
(__) A identificação de vírus respiratórios requer cultivo em células específicas ou diagnóstico molecular, não podendo ser feita por coloração de Gram e microscopia óptica tradicional.
A sequência está correta em
A
V, F, V, F.
B
F, V, F, V.
C
F, V, V, F.
D
V, F, F, V.
No método tradicional de elaboração de espumantes, a cinética de liberação de CO₂ é influenciada por diversos fatores. Qual das condições abaixo contribui diretamente para a retenção de CO₂ dissolvido no vinho durante o processo de segunda fermentação em garrafa?
A
Elevado conteúdo de sólidos suspensos oriundos da autólise, que atuam como núcleos de nucleação.
B
Temperatura de fermentação entre 15 e 18 °C, o que favorece o metabolismo secundário das leveduras.
C
Baixo coeficiente de solubilidade de CO₂ em pH ácido, o que reduz a pressão interna da garrafa.
D
A solubilidade do CO₂ aumenta com a pressão e a redução da temperatura, favorecendo sua incorporação ao vinho.
E
Alta concentração de leveduras no dégorgement.
Um laboratório de pesquisa utiliza coelhos para experimentos imunológicos. Durante uma vistoria de rotina, foi identificado que a manipulação de agentes químicos perigosos, como anestésicos voláteis, está sendo feita em uma sala sem ventilação adequada. Como resultado, há risco de exposição dos trabalhadores e dos animais aos vapores desses produtos. Assinale a alternativa que apresenta a medida mais adequada para a manipulação de agentes químicos perigosos.
A
Realizar a manipulação em qualquer ambiente da instalação, desde que os pesquisadores utilizem máscaras de pano.
B
Transferir a manipulação para uma área aberta, como um pátio externo, para evitar o acúmulo de vapores químicos na instalação.
C
Realizar a manipulação diretamente dentro das gaiolas dos animais, para evitar exposição dos trabalhadores.
D
Não adotar nenhuma medida especial, pois os agentes químicos voláteis não representam risco significativo à saúde, se utilizados em pequenas quantidades.
E
Utilizar capelas ou sistemas de exaustão adequados na área de manipulação de agentes químicos para garantir a ventilação adequada.
Um grupo de pesquisa está estudando os níveis de expressão de um gene envolvido na resposta inflamatória de camundongos submetidos a diferentes tratamentos. Para isso, o grupo opta por utilizar a técnica de PCR quantitativo em tempo real (qPCR), utilizando cDNA sintetizado a partir do RNA extraído dos tecidos desses camundongos. Além disso, os pesquisadores selecionaram um gene de referência estável para normalização dos dados. Assinale a alternativa que descreve corretamente um aspecto essencial do uso da qPCR no estudo apresentado.
A
A qPCR mede diretamente a quantidade de RNA em uma amostra sem necessidade de conversão para cDNA, facilitando a quantificação.
B
O gene de referência é utilizado apenas para verificar se a extração do RNA foi realizada com sucesso e não interfere na análise final.
C
A curva padrão gerada na qPCR é utilizada para determinar a eficiência da reação e a quantidade de produto amplificado em tempo real.
D
A fluorescência emitida durante a qPCR está diretamente relacionada ao consumo do primer específico utilizado na reação.
E
A técnica de qPCR não requer genes de referência quando o objetivo é comparar a expressão gênica entre diferentes amostras.
Na elaboração de harmonizações sofisticadas, a técnica conhecida como “espelhamento sensorial” consiste em:
A
Contrapor os sabores dominantes do prato com características opostas do vinho, como acidez frente à doçura ou taninos frente à gordura.
B
Combinar vinhos que possuem origem geográfica semelhante à do alimento, priorizando o conceito de terroir compartilhado.
C
Selecionar vinhos cujos descritores aromáticos, estrutura de corpo e persistência gustativa dialoguem diretamente com os elementos sensoriais do prato.
D
Priorizar vinhos com elevada acidez e baixa presença de taninos, para não interferirem no sabor principal da preparação.
E
Reproduzir, no vinho, as camadas texturais, térmicas e gustativas presentes no alimento, criando uma extensão sensorial multidimensional da refeição.
Antes da esterilização, as vidrarias devem ser lavadas com detergente neutro, enxaguadas com água destilada e secas ao ar ou em estufa.
C
Certo
E
Errado
O envelhecimento sur lies de espumantes pelo método tradicional pode modificar substancialmente a qualidade da espuma. O efeito mais relevante nesse sentido está relacionado ao(à)
A
maior extração de taninos dos resíduos de levedura, que aumentam a tensão superficial.
B
formação de cadeias de dextranas a partir de resíduos de fermentação alcoólica.
C
aumento do pH e a redução da solubilidade do gás carbônico com o tempo de garrafa.
D
ação residual de enzimas β-glucanases, que hidrolisam a parede celular da levedura, favorecendo a estabilização coloidal da matriz espumosa.
E
liberação de manoproteínas solúveis e sua interação com ácidos orgânicos e polifenóis.
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