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Durante a utilização de MALDI-TOF MS para tipagem...
Ano:
2025
Prova:
FUVEST - USP - Especialista em Laboratório - Área: Espectrometria - 2025
Durante a utilização de MALDI-TOF MS para tipagem bacteriana em nível de linhagem (strain typing), a qualidade dos espectros gerados e sua reprodutibilidade são determinantes para o sucesso da análise. Com base em protocolos padronizados e boas práticas descritas na literatura, assinale a alternativa que apresenta um fator técnico crítico que deve ser considerado para garantir a confiabilidade da análise e a correta diferenciação entre cepas bacterianas.
A
A coleta dos espectros deve ser feita exclusivamente em modo refletor negativo, com alta resolução e baixa frequência de laser, para aumentar a sensibilidade aos metabólitos secundários.
B
O uso de culturas bacterianas envelhecidas e meios seletivos enriquecidos é preferível, pois maximiza a expressão de proteínas regulatórias específicas para diferenciação clonal.
C
Para obtenção de espectros representativos, recomendase a aplicação direta da colônia sobre a placa MALDI sem extração química, evitando a diluição dos picos específicos de biomarcadores.
D
A criação de um espectro principal (Main Spectrum Profile, MSP) a partir de múltiplas aquisições replicadas e vários isolados da mesma cepa permite minimizar variabilidades técnicas e facilita a construção de dendrogramas reprodutíveis entre laboratórios.
E
O ajuste do algoritmo PCA deve priorizar exclusivamente a intensidade dos picos principais, independentemente da razão massa/carga, visto que a razão m/z tende a variar conforme o tempo de incubação.