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Questões de Concurso sobre Outros métodos instrumentais

 
 
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Ano: 2025
Prova: FUVEST - USP - Especialista em Laboratório - Área: Espectrometria - 2025

Na identificação de microrganismos usando MALDI-TOF Biotyper, sistema mais utilizado mundialmente e aprovado pela agência FDA dos Estados Unidos para análise de identificação de bactérias e leveduras, o uso de espectros de referência é fundamental. A obtenção de espectros de referência, seu uso em análises de identificação de microrganismos e a inclusão destes em bancos de dados para catalogação de novos microrganismos em bibliotecas espectrais fazem parte da rotina de análise, principalmente de organismos desconhecidos. Nesse contexto, em que consiste um espectro de massa de referência?


A

No conjunto dos 20 picos identificados em um espectro de massa com os maiores valores brutos de intensidades, com picos caracterizados pela soma das intensidades dos 20 picos mais abundantes encontrados.


B

No conjunto dos 20 picos mais prevalentes num espectro, e de maior soma de intensidade coletados em 100 espectros brutos acumulados. Aproximadamente 50% dos picos apresentam um valor de intensidade mínima de 2 x 105 e valores máximos de 50 S/N.


C

No perfil de valores de massa/carga de um conjunto de 20 picos brutos, cuja intensidade mínima de cada pico seja de 1 x 105 e o valor mínimo de S/N (sinal/ruído) seja de 200, com picos caracterizados com frequência mínima de 20% dentre os 20 espectros coletados.


D

Nos picos mais prevalentes em um conjunto de 20 espectros de massa brutos caracterizados por um valor massa/carga média e intensidade média dos picos. Aproximadamente 70 picos com uma frequência mínima de 25% de um pico dentre o conjunto de 20 espectros coletados compõem o espectro de massa de referência.


E

No conjunto de picos menos abundantes de um espectro de massa, correspondente ao grupo de proteínas ribossomais características dos microrganismos contidos em uma biblioteca de espectros. Tais espectros são constituídos quando encontrados em uma frequência mínima de 70% dos espectros acumulados de 20 espectros coletados.

Ano: 2025
Prova: FUVEST - USP - Especialista em Laboratório - Área: Espectrometria - 2025

Na análise de microrganismos por MALDI-TOF, é essencial identificar problemas técnicos no preparo das amostras que possam comprometer a qualidade dos espectros de massa e, consequentemente, a identificação dos microrganismos. Assinale a alternativa que apresenta, respectivamente, um problema comum no preparo de amostras em rotina de MALDI-TOF e sua resolução adequada.


A

Pico invertido. Usar uma matriz diferente.


B

Pico ausente. Verificar co-cristalização e volume da amostra.


C

Pico com alto ruído. Aumentar a temperatura.


D

Pico com base muito larga. Substituir o detector.


E

Pico com intensidade muito baixa. Substituir a bomba de vácuo.

Ano: 2025
Prova: FUVEST - USP - Especialista em Laboratório - Área: Espectrometria - 2025

A identificação de microrganismos, inclusive ao nível de espécie, usando a espectrometria de massa tipo MALDI-TOF, apresenta diversas vantagens em relação aos métodos tradicionais de identificação de microrganismos, sendo a principal delas a redução do tempo para obtenção dos resultados para bactérias já conhecidas e cujos espectros estejam disponíveis nas bibliotecas de espectros do instrumento utilizado. Assinale a alternativa na qual todos os métodos mencionados fazem parte do conjunto de métodos convencionais utilizados para a identificação de microrganismos.


A

Padrão de crescimento em diferentes meios de cultura, morfologia de colônia, coloração de Gram, caracterização bioquímica.


B

Padrão de coloração da colônia, reação com reativo de Gram, antibiograma, sequenciamento genômico, reações imunológicas.


C

Padrão de crescimento em diferentes meios de cultura, análise de expressão do 16SRNA, microscopia eletrônica de varredura, medida de absorbância.


D

Padrão de formação de biofilme, microscopia eletrônica de transmissão, padrão de crescimento em ausência e presença de oxigênio, análise de RNA-seq.


E

Coloração da cepa, produção de exopolissacarídeos, análise de genes de resistência, coloração de Gram.

A contagem diferencial de leucócitos é parte essencial da rotina de hematologia clínica. Sobre o tema, analise as alternativas abaixo:


I. Para a contagem diferencial de leucócitos a lâmina deve ser preparada pelo método de gota espessa.

II. A coloração Panótico é um método rápido para a coloração de lâminas hematológicas, mas não é considerado padrão ouro na rotina laboratorial.

III. Antes da preparação da lâmina, é obrigatório realizar o aquecimento da amostra em banhomaria a 37º para visualização do células imaturas.

IV. A coloração May-Grünwald-Giemsa pode ser utilizada na coloração do esfregaço sanguíneo.

V. Para a contagem diferencial de leucócitos é necessária a utilização da câmara de Neubauer, que permite determinar o número absoluto por mm³.


É correto o que se afirma em:


A

II, III e V.


B

I, II e IV.


C

IV e V.


D

I e III.


E

II e IV.

A nanociência consiste no estudo dos fenômenos observados durante a manipulação de nanomateriais em diferentes escalas, desde a macromolecular até a atômica.


C

Certo


E

Errado

Sobre a determinação de nitrogênio amoniacal em água e esgoto, assinale a alternativa correta:


A

Método de Fenol-hipoclorito: reação colorimétrica para nitrito a 540 nm.


B

Método de Kjeldahl: digestão ácida seguida de destilação e titulação com ácido sulfúrico.


C

Método de Winkler: titulação iodométrica para quantificar oxigênio dissolvido.


D

Método de Mohr: titulação com nitrato de prata para determinação de cloretos.


E

Método de Nessler: formação de um complexo amarelo-alaranjado medido por espectrofotometria a 425 nm.

Uma etapa de suma importância em análise de água é a coleta de amostras, que deve ser realizada de forma a não alterar a composição da amostra, bem como os resultados, uma vez que tais parâmetros são importantes para determinar a potabilidade da água para consumo. O Manual de procedimentos de amostragem e análise físico-química de água, documento da Embrapa, define alguns tipos de coletores de água para análise de várias fontes de água. Nesse contexto, assinale a alternativa que NÃO apresenta um tipo de coletor de água.


A

Coletores de água superficial.


B

Coletores de água subterrânea.


C

Coletores de água de precipitação.


D

Extratores de solução do solo.


E

Coletores de solo.

Ano: 2025
Prova: FUVEST - USP - Especialista em Laboratório - Área: Espectrometria - 2025

A cultura microbiológica de amostras compostas de leite para detecção de patógenos causadores de mastite subclínica apresenta sensibilidade relativamente alta, moderada e baixa para os seguintes microrganismos, respectivamente:


A

Streptococcus dysgalactiae, Corynebacterium spp. e Enterococcus spp.


B

Streptococcus agalactiae, Staphylococcus aureus e Corynebacterium spp.


C

Staphylococcus coagulase negativa, Streptococcus agalactiae e Corynebacterium spp.


D

Staphylococcus aureus, Staphylococcus coagulase negativa e Streptococcus uberis.


E

Escherichia coli, Enterococcus spp. e Staphylococcus coagulase negativa.

Ano: 2025
Prova: FUVEST - USP - Especialista em Laboratório - Área: Espectrometria - 2025

A espectrometria de massas MALDI-TOF tem evoluído de uma tecnologia voltada apenas à identificação rápida de microrganismos para microbiologia clínica, abrangendo aplicações como rastreamento de surtos, detecção de resistência antimicrobiana e identificação de patógenos emergentes. A incorporação de algoritmos de inteligência artificial (IA) e abordagens de bioinformática ampliou as possibilidades diagnósticas e epidemiológicas. Assinale a alternativa que apresenta uma tendência emergente e viável para o uso de MALDI-TOF MS associada à microbiologia clínica moderna.


A

Integração dos espectros MALDI com perfis de expressão gênica em tempo real.


B

Aplicar redes neurais artificiais para padronização de amostras biológicas, eliminando a necessidade de espectros de referência e controles internos no processamento do espectro.


C

Utilizar MALDI-TOF MS acoplado a ferramentas de aprendizado de máquina para detectar automaticamente biomarcadores de surtos infecciosos, permitindo a tipagem rápida de cepas clonais em tempo significativamente reduzido.


D

Integrar MALDI-TOF com sistemas de imageamento para análise simultânea de morfologia celular e assinatura espectral, substituindo a identificação baseada em m/z.


E

Reforçar o uso de MALDI-TOF para análise fenotípica de fungos filamentosos, integrando espectros de massa preditos da análise de bactérias e vírus por tecnologias genômicas para exclusão de picos coincidentes entre os diferentes organismos.

Ano: 2025
Prova: FUVEST - USP - Especialista em Laboratório - Área: Espectrometria - 2025

Para a identificação de um microrganismo desconhecido usando MALDI-TOF MS Biotyper, vários espectros de massa são gerados durante a análise da amostra no instrumento e analisados considerando a frequência, razão massa-carga (m/z) e intensidade dos picos nos espectros. Os espectros do microrganismo desconhecido são acumulados, e o espectro unificado resultante é convertido em uma lista de picos (peak list) para a análise de identificação. Assinale a alternativa que indica a etapa de procedimento de análise de dados que ocorre subsequente à criação de lista de picos para a identificação de um microrganismo.


A

Os dados da lista de picos do espectro obtido do microrganismo desconhecido são comparados com os dados das listas de picos dos espectros de referência contidos no banco de dados, e uma análise de ranqueamento de similaridade é realizada.


B

Os dados da lista de picos são submetidos a um algoritmo de deconvolução para reconstrução da sequência peptídica dos componentes do espectro, permitindo a identificação direta por comparação com bancos de dados genômicos.


C

Após a criação da lista de picos, o espectro é normalizado por espectrometria tandem (MS/MS), em que fragmentos secundários são gerados e comparados com espectros de fragmentação padronizados na biblioteca de espectros de referência.


D

A lista de picos é convertida em um espectro bidimensional, no qual os sinais são reorganizados por tempo de retenção cromatográfica e força de absorção da matriz, antes da classificação taxonômica em bancos de dados genômicos.


E

A intensidade dos picos monoisotópicos é comparada à intensidade dos picos monoisotópicos de espectros de referência presentes na biblioteca espectral de referência.

Ano: 2025
Prova: FUVEST - USP - Especialista em Laboratório - Área: Espectrometria - 2025

Uma lista de picos (peak list) gerada por MALDI-TOF contém, no mínimo, informações sobre:


A

Pares de valores de massa e valores de área sobre o pico extraídos das médias dos picos originais.


B

Intensidade relativa dos íons, tempo de retenção cromatográfica e número de transições de carga para cada pico detectado.


C

Carga dos íons, comprimento de onda do laser e energia de ionização de cada pico observado.


D

Pares de valores de razão massa-carga (m/z) e valores de intensidade extraídos dos picos centroides originais.


E

Deconvolução das massas de picos isotópicos e soma das cargas dos picos identificados.

Técnicas de contraste em microscopia: qual alternativa discrimina corretamente o princípio do contraste de fase em relação ao campo escuro?


A

O contraste de fase converte diferenças de fase em variações de intensidade; o campo escuro bloqueia a luz direta e destaca a luz espalhada lateralmente pelo objeto.


B

O contraste de fase depende de polarização linear do feixe; o campo escuro depende de filtros cromáticos; ambas exigem óleo de imersão em todas as objetivas.


C

O contraste de fase elimina halos ao fechar totalmente o diafragma de campo; o campo escuro centraliza a luz direta pela abertura do condensador.


D

O contraste de fase requer laser coerente para modulação; o campo escuro utiliza o diafragma de abertura como fonte primária de iluminação.

Controle de qualidade em microscopia: qual alternativa distingue corretamente controle interno e controle externo?


A

O controle interno utiliza amostras cegas enviadas por entidade externa; o controle externo monitora estabilidade do banho de corantes do serviço.


B

O controle interno acompanha parâmetros do processo (reagentes, tempos e equipamentos); o controle externo compara desempenho entre laboratórios por painéis de proficiência e análise interlaboratorial.


C

O controle interno é eventual e depende de auditoria anual; o controle externo consiste em duplicar a leitura de todas as lâminas do turno.


D

O controle interno é opcional em métodos diretos; o controle externo dispensa rastreabilidade de lote e data das lâminas.

Um paciente de 29 anos, sem comorbidades conhecidas, procurou atendimento após exposição de risco com parceiro sorológico desconhecido há cerca de 21 dias. Apresentava sintomas inespecíficos como febre baixa, mialgia e linfadenopatia cervical. Foi solicitado um imunoensaio de 4ª geração (teste de triagem para HIV), cujo resultado foi reagente. Diante do achado, foram realizados os exames confirmatórios.


Considerando os exames imunológicos utilizados no diagnóstico da infecção pelo HIV e os protocolos do Ministério da Saúde, qual das afirmações abaixo está CORRETA?


A

O imunoensaio de 4ª geração detecta simultaneamente anticorpos anti-HIV-1/2 e o antígeno p24, sendo capaz de reduzir a janela imunológica para cerca de 15 a 20 dias após a infecção.


B

A detecção de anticorpos isoladamente é suficiente para confirmar a infecção pelo HIV, mesmo em testes rápidos de triagem.


C

A carga viral (RNA-HIV) é utilizada apenas para monitoramento da infecção já confirmada e não tem papel no diagnóstico inicial.


D

O teste confirmatório do tipo Western blot continua sendo obrigatório no Brasil como padrão ouro para confirmação diagnóstica.


E

A pesquisa do antígeno p24 é um teste obsoleto e foi totalmente substituído pelos testes moleculares; não sendo mais utilizado nos protocolos atuais.

Na identificação de Streptococcus uberis, podem ser obtidos os seguintes resultados:


A

Catalase negativa, CAMP negativo, hidrólise da esculina positiva, crescimento em caldo com 6,5% de NaCl positivo, teste de PYR positivo, hidrólise do hipurato de sódio negativo.


B

Catalase negativa, CAMP positivo, hidrólise da esculina negativa, crescimento em caldo com 6,5% de NaCl negativo, teste de PYR positivo, hidrólise do hipurato de sódio negativo.


C

Catalase positiva, CAMP variável, hidrólise da esculina positiva, crescimento em caldo com 6,5% de NaCl positivo, teste de PYR positivo, hidrólise do hipurato de sódio positiva.


D

Catalase negativa, CAMP variável, hidrólise da esculina positiva, crescimento em caldo com 6,5% de NaCl negativo, teste de PYR negativo, hidrólise do hipurato de sódio positiva.


E

Catalase negativa, CAMP negativo, hidrólise da esculina positiva, crescimento em caldo com 6,5% de NaCl positivo, teste de PYR negativo, hidrólise do hipurato de sódio negativo.

Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization (MALDI) é uma técnica de ionização amplamente utilizada em espectrometria de massas devido à sua capacidade de analisar moléculas de alto peso molecular com alta sensibilidade e baixa fragmentação. Sobre a aplicação da MALDI, é correto afirmar que


A

é tipicamente acoplada à cromatografia a gás, pois permite a separação eficiente de compostos moderadamente polares e voláteis.


B

utiliza um feixe de laser de infravermelho para ionizar diretamente moléculas no estado gasoso, sendo mais adequada para compostos inorgânicos voláteis.


C

é frequentemente acoplada a espectrômetros de massas com analisadores tipo Orbitrap, mas sua aplicação é limitada a amostras líquidas injetadas por difusão direta.


D

pode ser combinada com a separação por eletroforese em gel bidimensional (2D-PAGE), sendo amplamente utilizada na análise de proteínas e peptídeos em estudos de proteômica.


E

é restrita à análise de compostos orgânicos pequenos e voláteis, que não requerem preparo de amostra nem condições de vácuo.

A espectrofotometria UV-VIS pode ser usada para quantificar, por exemplo, a concentração de alguns componentes de fármacos ou alimentos.


Em relação a esse método de análise instrumental, é correto afirmar que


A

só podem ser analisadas substâncias coloridas, ou seja, que absorvam na região visível do espectro eletromagnético.


B

para que um analito possa ser quantificado em pequenas quantidades, a análise deve ser feita em um comprimento de onda de mínima absorbância.


C

para que um analito possa ser quantificado, deve haver uma relação linear entre sua concentração na amostra e a transmitância lida no aparelho.


D

para que um analito possa ser quantificado, a absorbância do analito deve ser diretamente proporcional a sua absortividade, sua concentração e comprimento do caminho ótico.

Durante uma análise volumétrica, o controle dos volumes medidos é fundamental para a obtenção de resultados precisos. Nesse sentido, analise as assertivas a seguir:


I. Se a temperatura ambiente for significativamente diferente de 20 °C, o volume de uma pipeta volumétrica pode não corresponder ao valor nominal, afetando a precisão da medição.

II. A dilatação térmica do líquido e do recipiente sempre ocorre na mesma proporção, de modo que os efeitos da variação de temperatura são automaticamente compensados.

III. Para minimizar os erros de medição decorrentes da variação de temperatura, recomenda-se realizar as análises em ambiente com temperatura controlada próxima ao valor de calibração dos aparelhos.


Quais estão corretas?


A

Apenas I.


B

Apenas II.


C

Apenas III.


D

Apenas I e III.


E

I, II e III.

Sobre a Espectroscopia Molecular UV/Vis, analise as assertivas a seguir e assinale a alternativa correta.


I. A Lei de Beer-Lambert estabelece que a absorbância de uma solução é diretamente proporcional à concentração do analito e ao comprimento do caminho óptico da célula.

II. Na espectroscopia UV/Vis, a transmitância é a razão entre a intensidade da radiação transmitida e a intensidade da radiação incidente.

III. A técnica UV/Vis pode ser utilizada para análises qualitativas, como a identificação de compostos por seus espectros de absorção característicos, e análises quantitativas, como a determinação da concentração de substâncias.

IV. O monocromador em um espectrofotômetro UV/Vis tem a função de selecionar o comprimento de onda desejado, eliminando radiações indesejadas e melhorando a precisão das medidas.


A

Todas as assertivas estão corretas.


B

Todas as assertivas estão incorretas.


C

Apenas as assertivas II e IV estão corretas.


D

Apenas as assertivas I, II e III estão corretas.

 
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