A reação em cadeia da polimerase (PCR) é uma técnica...

A reação em cadeia da polimerase (PCR) é uma técnica utilizada em biologia molecular para amplificação de segmentos de ácidos nucleicos. Sobre essa metodologia, analise as afirmativas.

I- A primeira etapa da PCR consiste na desnaturação do DNA pela elevação de temperatura, que mimetiza a ação da enzima helicase, induzido o rompimento das interações por pontes de hidrogênio entre as fitas poliméricas.

II- Sem a adição de pequenas sequências de RNA, denominadas primers, que servem como iniciadores para a ação da enzima polimerase, a amplificação do material genético não ocorre, mesmo estando o DNA extraído em perfeitas condições biológicas.

III- Na etapa de anelamento, ocorre o resfriamento do sistema, realizado com o objetivo de possibilitar a ligação dos primers ou iniciadores às fitas simples de ácidos nucleicos, que ocorre por meio de pontes de hidrogênio.

IV- Os primers utilizados na PCR devem ser extraídos de bactérias termófilas, pois precisam resistir a elevadas temperaturas durante o ensaio.

V- Na PCR em tempo real, o anelamento dos primers permite a detecção de sequências específicas de DNA, uma vez que esses fragmentos podem ser ligados a moléculas fluorescentes.

VI- A RT-PCR permite a amplificação de sequências de RNA em uma amostra biológica, porém é dependente da presença de uma RNA polimerase denominada transcriptase reversa.

Estão corretas as afirmativas