A reação em cadeia da polimerase (PCR) é uma técnica utilizada em biologia molecular para amplificação de segmentos de ácidos nucleicos. Sobre essa metodologia, analise as afirmativas.
I- A primeira etapa da PCR consiste na desnaturação do DNA pela elevação de temperatura, que mimetiza a ação da enzima helicase, induzido o rompimento das interações por pontes de hidrogênio entre as fitas poliméricas.
II- Sem a adição de pequenas sequências de RNA, denominadas primers, que servem como iniciadores para a ação da enzima polimerase, a amplificação do material genético não ocorre, mesmo estando o DNA extraído em perfeitas condições biológicas.
III- Na etapa de anelamento, ocorre o resfriamento do sistema, realizado com o objetivo de possibilitar a ligação dos primers ou iniciadores às fitas simples de ácidos nucleicos, que ocorre por meio de pontes de hidrogênio.
IV- Os primers utilizados na PCR devem ser extraídos de bactérias termófilas, pois precisam resistir a elevadas temperaturas durante o ensaio.
V- Na PCR em tempo real, o anelamento dos primers permite a detecção de sequências específicas de DNA, uma vez que esses fragmentos podem ser ligados a moléculas fluorescentes.
VI- A RT-PCR permite a amplificação de sequências de RNA em uma amostra biológica, porém é dependente da presença de uma RNA polimerase denominada transcriptase reversa.
Estão corretas as afirmativas
II, IV e V, apenas.
I, II, III e VI, apenas.
I, II e VI, apenas.
III e V, apenas.
III, IV, V e VI, apenas.