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Questões de Concurso sobre PCR e outras técnicas de biologia molecular
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A malária é uma doença infecciosa causada por um parasito do gênero Plasmodium, que é transmitido para humanos pela picada das fêmeas infectadas dos mosquitos Anopheles. Uma das técnicas utilizadas para a detecção desse parasito é o PCR em tempo real (qPCR).
As fases dessa técnica contemplam as seguintes etapas:
A
desnaturação, anelamento, extensão e aplicação do produto da reação de PCR em tempo real no gel de agarose.
B
anelamento, extensão e aplicação do produto da reação de PCR em tempo real no gel de agarose.
C
anelamento e extensão.
D
desnaturação, anelamento e extensão.
E
extensão e aplicação do produto da reação de PCR em tempo real no gel de agarose.
O sequenciamento de Sanger é um método fundamental para determinar a ordem dos nucleotídeos no DNA por meio da utilização de DNA polimerase, primers e ddNTPs fluorescentes, que interrompem a síntese do DNA de forma controlada.
C
Certo
E
Errado
O excesso de DNA presente em uma amostra pode gerar artefatos na reação de PCR que dificultam a interpretação dos resultados.
C
Certo
E
Errado
A amplificação consiste em um processo enzimático no qual uma região específica do DNA é replicada repetidamente para produzir várias cópias de uma sequência específica.
C
Certo
E
Errado
Para a obtenção de ácidos nucleicos na busca de identificação de espécies em produtos derivados de animais, como marfim, couro e embutidos (como presuntos), é necessário o rompimento da parede celular, que, devido a sua composição proteica, pode ser aberta com o uso de enzimas de atividade exonuclease.
C
Certo
E
Errado
As moléculas analisadas para a obtenção dos padrões de expressão (transcriptoma) são do tipo ácido ribonucleico com uma base modificada, a 7-metilguanosina, na extremidade 3’, formando o CAP.
C
Certo
E
Errado
Trata-se de uma técnica laboratorial, por meio da qual um segmento da molécula de DNA é duplicado e, com esse procedimento, poucas cópias de uma sequência de DNA podem ser amplificadas em um grande número, viabilizando a análise e aumentando o potencial das possíveis fontes de amostras forenses.
Essa definição refere-se à
A
análise de Southern Blot.
B
técnica RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism).
C
técnica de PCR (Reação da Cadeia de Polimerase).
D
PAGE (Polyacrylamide Gel Electrophoresis).
E
eletroforese capilar.
O pesquisador Kary Mullis, em 1985, revolucionou a biologia molecular com a técnica da reação em cadeia de polimerase (PCR) que possibilitou
A
amplificar cópias de sequência mitocondriais.
B
reduzir cópias de sequência específica de DNA.
C
reduzir cópias de bases púricas.
D
amplificar cópias de bases pirimidínicas.
E
amplificar cópias de sequência específica de DNA.
Na reação em cadeia de polimerase (PCR), pode-se afirmar que
A
o alvo inicial é uma molécula de DNA de fita simples.
B
as fitas do DNA são separadas por resfriamento.
C
os primers não demarcam a região-alvo de amplificação.
D
o DNA polimerase sintetiza novas fitas de DNA, complementares ao molde.
E
após novo resfriamento, as fitas de DNA originais e recém-sintetizadas se separam.
Atualmente, as técnicas de amplificação e detecção de ácidos nucléicos estão entre as ferramentas mais valiosas na pesquisa biológica. A Reação em Cadeia da Polimerase (Polymerase Chain Reaction - PCR) se tornou a pedra angular da biologia molecular moderna em todo o mundo. Esta metodologia e suas variações permitem desde a amplificação do DNA de um dente de um cadáver esqueletizado até o diagnóstico da COVID-19 (RT-PCR). É sabido que a PCR tem três etapas que se repetem dezenas de vezes até que milhões de cópias de material genético sejam obtidas e, neste contexto, assinale a alternativa correta e que contém, respectivamente, o nome do equipamento que permite a realização da reação de PCR, bem como as duas primeiras etapas da PCR:
A
Termoshaker; desnaturação e anelamento.
B
Termociclador; anelamento e extensão.
C
Sequenciador; anelamento e extensão.
D
Termoshaker; anelamento e extensão.
E
Termociclador; desnaturação e anelamento.
Entre os inibidores da técnica PCR, rotineiramente presentes em amostras forenses, destacamos:
A
o copolímero de estireno.
B
o divinilbenzeno.
C
o ácido húmico.
D
a betaína.
E
o DMSO (dimetil sulfóxido).
Sobre genética forense, assinale a alternativa INCORRETA.
A
Em cenas de crime, costumam serem fontes de DNA bitucas de cigarro, manchas de sangue, manchas de sêmen, conteúdo de preservativos, objetos de uso pessoal, etc, sendo que, em todos eles, se procura, de forma preferencial, DNA mitocondrial.
B
A tecnologia da PCR permite multiplicar em vários bilhões de cópias regiões definidas do DNA, reduzindo a quantidade de material biológico necessário à análise das sequências repetitivas e DNA.
C
O DNA pesquisado pode ser o nuclear ou mitocondrial, sendo que, em condições normais, é pesquisado em sangue, material de polpa dentária, mucosa oral, medula óssea, dentre outros tecidos; o mitocondrial é usado quando há impossibilidade de uso do nuclear.
D
Quando o médico legista faz coleta de material em seres humanos vivos para confronto genético, é necessário que o mesmo consinta com o confronto e preencha um termo de consentimento livre e esclarecido. Juízes podem determinar a coleta de presos do sistema penitenciário para compor banco genético, na forma da lei.
E
São fontes de material genético, em casos de agressão sexual, materiais encontrados nas unhas da vítima, material vaginal, anal; material genético em locais onde foi deixada saliva, tais como mordeduras e lambeduras, pelos púbicos do agressor na vulva da vítima, dentre outras fontes.
Ano:
2010
Acerca da genética forense, assinale a alternativa correta.
A
Segundo o equilíbrio de Hardy-Weinberg, em uma população mendeliana, os genes raros tendem a desaparecer ao longo das gerações.
B
O DNA mitocondrial, por ser mais resistente às intempéries que o nuclear, deve ser utilizado em casos de exumação para exame de paternidade.
C
As polimerases são enzimas que sintetizam cadeias de nucleótidos a partir de trifosfatos de nucleósidos.
D
A deriva genética ocorre em maior frequência em populações numerosas que em populações reduzidas.
E
A adenina e guanina são pirimidinas, enquanto que a citosina e timina são purinas.
A técnica de westhern blot consiste na análise de sequências de
RNA cortados por enzimas de restrição.
C
Certo
E
Errado
O sequenciamento do DNA utiliza análogos químicos de
nucleotídios marcados (nucleotídeos didesóxi — ddNTPs) para
inibir a enzima DNA polimerase, interrompendo a síntese do
filamento complementar.
C
Certo
E
Errado
Infelizmente a PCR não pode ser aplicada à análise de
amostras de RNA, pois ainda não se conhece nenhuma enzima
capaz de promover a transcrição reversa.
C
Certo
E
Errado
Atualmente, existem máquinas especialmente criadas para a
realização de PCR, nas quais uma rodada de amplificação
pode durar apenas alguns minutos.
C
Certo
E
Errado
Os primers são desenhados de modo tal que um deles seja
complementar a um filamento de DNA de um lado da
sequência-alvo e o outro, ao filamento de DNA no lado oposto
da sequência-alvo.
C
Certo
E
Errado
A PCR consiste em nada mais que ciclos de desnaturação por
aquecimento, hibridização aos primers e síntese enzimática de
DNA, que ocorrem em temperatura constante.
C
Certo
E
Errado
A alta fidelidade na replicação do DNA é resultado, entre outros fatores, da atividade exonucleásica da DNA polimerase, que é capaz de corrigir erros de replicação.
C
Certo
E
Errado
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