Questões de Concurso sobre Biologia molecular

 
 
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Durante a replicação do DNA, diversas enzimas e proteínas atuam de maneira coordenada e com funções específicas para garantir a duplicação fiel do material genético.


Considerando as funções descritas a seguir:


I. Síntese de novas fitas de DNA a partir de precursores nucleotídicos.

II. Desenrolamento da dupla hélice do DNA.

III. Separação inicial das cadeias nas origens de replicação.

IV. Estabilização das fitas simples de DNA durante o processo replicativo.

V. Prevenção do superenovelamento do DNA à frente da forquilha de replicação.


Associe CORRETAMENTE cada função às respectivas enzimas ou proteínas:


( ) Helicase

( ) DNA-topoisomerases

( ) Proteínas SSP (single strand proteins)

( ) DNA-polimerases

( ) DnaA


A alternativa que apresenta a associação CORRETA, na ordem apresentada, é:


A

II – V – III – IV – I.


B

II – I – III – V – IV.


C

I – II – V – IV – III.


D

III – V – I – IV – II.


E

II – V – IV – I – III.

Durante a investigação de um crime, peritos coletaram um fio de cabelo sem bulbo encontrado na cena.


Considerando as técnicas de biologia molecular utilizadas em análises forenses, o método mais adequado para tentar identificar o indivíduo ao qual o cabelo pertence, é a


A

aplicação da PCR convencional para amplificar o DNA nuclear da amostra.


B

análise do DNA mitocondrial por meio de PCR e sequenciamento.


C

separação das proteínas do cabelo por eletroforese em gel de poliacrilamida.


D

avaliação da expressão gênica por quantificação de RNA mensageiro.


E

investigação dos compostos lipídicos da cutícula capilar por cromatografia.

A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é uma técnica molecular utilizada para amplificar in vitro segmentos específicos de DNA, gerando bilhões de cópias para estudos detalhados. No diagnóstico fitopatológico, a etapa que determina a exatidão e a especificidade do ensaio é a escolha correta dos primers (iniciadores).


Sobre a função e as características desses primers na reação, assinale a alternativa CORRETA.


A

Os primers são consumidos apenas no primeiro ciclo da PCR, servindo de molde para os ciclos subsequentes.


B

A temperatura de anelamento dos primers independe da sua composição de bases nitrogenadas.


C

Sua principal função é atuar como enzima catalisadora, ligando os desoxirribonucleotídeos trifosfatos (dNTPs) na fita molde.


D

São sequências curtas de RNA de fita simples que se ligam aleatoriamente a qualquer região do genoma do hospedeiro para iniciar a síntese.


E

Devem ser desenhados em pares (forward e reverse), flanqueando a região do DNA do patógeno que se deseja amplificar.

Um laboratório especializado em diagnóstico molecular vegetal recebeu amostras foliares suspeitas de infecção por vírus RNA. O técnico responsável precisava garantir que o material genético extraído permanecesse íntegro até o momento da análise molecular. Para isso, foram adotadas medidas relacionadas ao armazenamento e conservação das amostras. Assinale a alternativa que apresenta a temperatura mais adequada de armazenamento a longo prazo (meses e anos) para garantir a integridade do RNA total extraído para aplicações como RT-PCR e sequenciamento.


A

-80 °C.


B

10°C.


C

25 a 30°C.


D

37 °C.


E

4 °C

A tecnologia do DNA recombinante permitiu o isolamento, a clonagem e a introdução de genes em diferentes organismos, possibilitando o desenvolvimento da engenharia genética e a produção de organismos transgênicos. Com base nos conceitos, técnicas e aplicações da engenharia genética, assinale a opção correta.


A

A engenharia genética corresponde à utilização de técnicas de mutagênese aleatória, sem o emprego de vetores, sendo restrita à modificação de genomas bacterianos.


B

A clonagem gênica clássica consiste na introdução direta de genes eucarióticos em células animais, dispensando sua amplificação prévia em organismos hospedeiros.


C

A utilização de plasmídios e bacteriófagos como vetores permite a clonagem de genes, que são introduzidos em células bacterianas, onde se replicam juntamente com o DNA do hospedeiro.


D

Um organismo transgênico é definido como aquele que apresenta apenas genes endógenos modificados por mutações espontâneas ou induzidas.


E

A engenharia genética limita-se à caracterização de sequências de DNA, não permitindo a alteração do genótipo e do fenótipo de um organismo.

Uma macromolécula isolada de células eucarióticas apresentou as seguintes características experimentais:


I. é um polímero linear formado por ligações fosfodiéster;

II. apresenta absorção máxima em 260 nm no espectrofotômetro;

III. mantém carga elétrica negativa em pH fisiológico, devido à presença de grupos ionizáveis repetitivos.


Com base nessas propriedades estruturais e físico-químicas, conclui-se que a biomolécula isolada


A

é uma proteína ácida com elevada quantidade de resíduos fosforilados.


B

trata-se de um polímero proteico associado a cofatores nucleotídicos.


C

é um lipídeo complexo com cabeça polar carregada negativamente.


D

corresponde a um polissacarídeo estrutural com grupos sulfato ionizáveis.


E

pertence à classe dos ácidos nucleicos, podendo corresponder tanto a DNA quanto a RNA.

Vetores não virais vêm sendo otimizados por nanotecnologia para superar limitações de eficiência na transfecção gênica. Sobre vetores não virais baseados em nanopartículas, marque a opção correta.


A

Apresentam maior eficiência de transdução que vetores virais, sendo padrão ouro clínico.


B

Permitem transporte de grandes cargas genéticas e apresentam menor imunogenicidade relativa.


C

São incapazes de atravessar membranas celulares sem mecanismos ativos dependentes de vírus.


D

Possuem integração genômica obrigatória, garantindo expressão duradoura.

Nas modificações epigenéticas no DNA (ácido desoxirribonucleico) há


A

alteração da sequência do DNA.


B

mudanças de bases nitrogenadas.


C

mutações cromossômicas.


D

metilação do DNA.

Ao ingressar em um laboratório de procedimentos microbiológicos, o técnico de laboratório recebeu o treinamento adequado. Após esse período foi orientado a realizar a extração de DNA da bactéria Bacillus subtilis, utilizando as instruções descritas no Protocolo Operacional Padrão (POP). Sobre o POP é correto afirmar que:


A

É facultativo aos usuários do laboratório, incluindo o técnico, realizar os procedimentos seguindo o POP.


B

O POP deverá ter várias versões vigentes de um mesmo procedimento, ficando a critério do técnico a escolha de qual versão usar.


C

O POP deverá conter informações claras e inequívocas com revisão periódica, que permitam a execução de um procedimento técnico.


D

Para ter acesso ao POP de determinado procedimento é necessário aos usuários do laboratório a solicitação prévia do documento ao gestor do laboratório.

Durante a replicação do DNA, a enzima DNA polimerase catalisa a síntese das novas cadeias utilizando as fitas parentais como molde. Esse processo apresenta características específicas relacionadas à direção da síntese, à necessidade de um iniciador e à correção de erros durante a incorporação de nucleotídeos. Considerando as propriedades moleculares da DNA polimerase e o mecanismo de replicação do DNA, assinale a alternativa CORRETA.


A

A síntese de DNA ocorre no sentido 3' → 5', pois a enzima DNA polimerase necessita de uma extremidade 5' livre para adicionar novos nucleotídeos.


B

A DNA polimerase inicia a síntese de DNA diretamente sobre a fita molde e adiciona nucleotídeos na extremidade 5' da cadeia em crescimento.


C

A DNA polimerase reconhece erros durante a replicação, mas não possui capacidade de removê-los, sendo essa função exclusiva de outras enzimas do sistema replicativo.


D

A replicação semiconservativa caracteriza-se pela formação de duas moléculas-filhas compostas apenas por cadeias recém-sintetizadas.


E

A DNA polimerase adiciona nucleotídeos na extremidade 3' da cadeia em formação, razão pela qual a síntese da nova fita ocorre no sentido 5' → 3'.

A metilação do DNA consiste em uma modificação química que ocorre em determinadas bases nitrogenadas, podendo influenciar a expressão gênica sem alterar a sequência de nucleotídeos do DNA. Com base nesse processo, assinale a alternativa CORRETA.


A

Em células procarióticas, a metilação ocorre apenas em resíduos de citosina, não sendo observada em adenina.


B

Em células eucarióticas, a metilação do DNA ocorre predominantemente em resíduos de citosina, formando a 5-metilcitosina.


C

A metilação do DNA é um processo espontâneo que ocorre independentemente da ação de enzimas específicas.


D

A metilação do DNA ocorre exclusivamente em resíduos de adenina em eucariotos, sendo responsável pela alteração direta da sequência de bases do DNA.


E

A metilação do DNA promove sempre mutações permanentes na sequência genética do organismo.

A regulação da expressão gênica permite que as células respondam a estímulos ambientais e coordenem o desenvolvimento tecidual através de mecanismos transcricionais e epigenéticos. Acerca do assunto, registre V, para as afirmativas verdadeiras, e F, para as falsas:


( )O operon lac é um sistema induzível em bactérias onde a presença de lactose inativa o repressor, permitindo a transcrição dos genes para o metabolismo do açúcar.

( )A acetilação das histonas promove a compactação da cromatina em heterocromatina, dificultando o acesso da RNA polimerase aos promotores gênicos.

( )A metilação do DNA em ilhas CpG está frequentemente associada ao silenciamento gênico e à manutenção de padrões de expressão estáveis durante a diferenciação.

( )Os fatores de transcrição são moléculas de RNA de interferência que degradam o DNA nuclear antes do início da síntese proteica em células somáticas.


Após análise, assinale a alternativa que apresenta a sequência correta dos itens acima, de cima para baixo:


A

V, F, V, F.


B

F, F, V, F.


C

F, V, V, F.


D

V, V, F, V.


E

V, F, V, V.

A área da biologia molecular que estuda o conjunto total de proteínas expressas por uma célula, tecido ou organismo em um determinado momento e condição fisiológica é denominada de


A

Genômica.


B

Transcriptômica.


C

Proteômica.


D

Metagenômica.

Uma molécula de DNA é constituída por 800 pares de nucleotídeos. Considerando que 20% desses nucleotídeos são constituídos por uma base nitrogenada púrica que se estabiliza com 2 pontes de hidrogênio, determine a quantidade total de guaninas e pontes de hidrogênio dessa molécula de DNA, respectivamente, e assinale a alternativa correta.


A

480 e 2080.


B

240 e 1040.


C

120 e 1040.


D

80 e 640.


E

640 e 1440.

A etapa de precipitação do DNA é fundamental para concentrar e dessalinizar os ácidos nucleicos. O uso de álcoois como etanol e isopropanol desidrata o DNA, tornando-o insolúvel e permitindo que ele se aglomere e forme um pellet após a centrifugação. Sobre essa etapa, é CORRETO afirmar que


A

a adição de álcool rompe as ligações de hidrogênio da fita de DNA, facilitando a sua solubilização antes da centrifugação.


B

a adição desses álcoois aumenta a constante dielétrica da solução, facilitando a solubilidade do DNA.


C

o álcool deve estar a 55℃ para facilitar a dissolução das proteínas remanescentes.


D

o etanol é a melhor opção para precipitar DNA em grandes volumes, pois exige um volume de álcool significativamente menor que o isopropanol.


E

o etanol 70% é utilizado na lavagem final para remover sais residuais do pellet de DNA.

Em um laboratório de biologia molecular, um técnico precisava preparar uma solução Tris-EDTA, frequentemente utilizada para armazenamento e conservação de DNA. Como o desempenho da solução depende do ajuste adequado do pH, foi necessário realizar previamente a calibração do pHmetro de bancada para garantir maior confiabilidade das medições durante o preparo da solução.


Com relação ao processo de calibração correta do pHmetro, assinale a alternativa CORRETA.


A

O eletrodo deve ser enxaguado com água destilada entre as soluções tampão utilizadas durante a calibração, evitando interferências causadas por resíduos da solução tampão anterior.


B

A sequência de calibração pode ser realizada utilizando soluções tampão em qualquer ordem, pois a sequência não interfere na confiabilidade do ajuste do equipamento.


C

A utilização de uma única solução tampão é suficiente para qualquer situação analítica, independentemente da faixa de pH esperada na solução preparada.


D

A utilização das soluções tampão tem apenas a finalidade de verificar o funcionamento do eletrodo, não participando do ajuste do equipamento.


E

O procedimento de calibração elimina a necessidade de considerar fatores relacionados à temperatura durante a realização das medições.

Protocolos de extração de DNA exigem o cumprimento de etapas e procedimentos que objetivam obter o conteúdo íntegro e sem contaminações adicionais. Identificar a opção que descreve uma ação correta nestes procedimentos.


A

A centrifugação é uma técnica necessária no processo de extração de DNA.


B

O manuseio de amostras de DNA não exige uso de luvas ou plásticos descartáveis.


C

Assim como ocorre para a extração de proteínas, a lise celular não é necessária para a extração de DNA.


D

A insolubilidade do DNA em água permite a sua extração facilitada do meio celular por meio de precipitação.

Miller e Urey validaram o modelo de evolução molecular de Oparin e Haldane ao realizarem um experimento onde aminoácidos foram sintetizados por meio de descargas elétricas em um ambiente gasoso isolado. O teste demonstrou que as condições ambientais da Terra primitiva seriam favoráveis à transição da matéria inorgânica para as primeiras moléculas orgânicas.

No experimento de Miller e Urey, foram usados


A

, , , e .


B

, , e .


C

, , e .


D

, , e .


E

, , e .

A técnica de flow chip é um método molecular de detecção de sequências específicas de DNA em amostras usando um chip com membrana de nylon. É um método rápido para rastreamento de múltiplos patógenos simultaneamente em amostras e útil, pois é executado em poucas horas até o resultado. Quais metodologias existem nesse teste e como elas são utilizadas?


A

Amplificação do DNA por PCR seguida de hibridização reversa do DNA amplificado com sondas específicas (já imobilizadas na membrana do chip) que levam a uma reação colorimétrica caso as sondas se liguem ao DNA.


B

Amplificação por PCR em tempo real, seguida por emissão de fluorescência das sondas específicas para cada patógeno analisado; as sondas são imobilizadas no chip, onde a fluorescência é detectada.


C

Imobilização de anticorpos contra sequências específicas de DNA de patógenos na membrana do chip, com reação caso haja amplificação do DNA do patógeno na amostra do paciente.


D

Reação de amplificação isotérmica do DNA, acoplada com uma hibridização reversa do DNA, que utiliza sondas específicas já imobilizadas na membrana do chip; a visualização é colorimétrica, caso as sondas se liguem ao DNA amplificado.

Em discussão sobre material genético, o professor pergunta como o DNA relaciona-se com características herdadas e com o funcionamento das células. Marque a afirmação que apresenta uma visão CORRETA desse papel.


A

O DNA fica espalhado no citoplasma, participa de reações energéticas e cumpre função semelhante à do ATP em vários tecidos.


B

A molécula de DNA atua como reserva central de sais minerais, que se acumulam para uso posterior em reações metabólicas.


C

O DNA atua apenas em células germinativas, apresenta pouca ligação com atividades de tecidos presentes em outras regiões do corpo.


D

Em organismos multicelulares, células sanguíneas carecem de DNA, o que limita o uso desse tecido em identificação genética


E

O DNA guarda informações genéticas, organiza-se em cromossomos, duplica-se em divisões celulares e orienta a síntese de moléculas ligadas a características herdadas.

   
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