Questões de Concurso sobre Biologia molecular

 
 
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A prática de biologia molecular encerra um conjunto amplo de protocolos padronizados e o uso de diferentes tecnologias disponibilizadas em equipamentos específicos. Dentre os equipamentos utilizados em experimentação de biologia molecular podemos apontar:


A

Espectrofotômetro; leitor de ELISA e microscópio óptico.


B

Termociclador tipo qPCR/RT-qPCR; transiluminador e freezer - 80C.


C

Termociclador tipo PCR; Sequenciador de nucleotídeos e Sistema de eletrofores em gel.


D

Cromatógrafo; espectropolalímetro de dicroismo celular e Sistema de eletroforese em gel.

Assinale a alternativa que apresenta, respectivamente, a quantidade total de timinas e de pontes de hidrogênio de uma molécula de DNA constituída por 4000 pares de nucleotídeos e que, do total de bases nitrogenadas, 20% são de uma base púrica que necessita de 3 pontes de hidrogênio para se ligar à base correspondente.


A

2400 e 9600.


B

1200 e 4800.


C

1200 e 9600.


D

2400 e 4800.


E

1600 e 2400.

Os Sistemas de reparo de DNA corrigem lesões no material genético, evitando efeitos danosos na leitura e na tradução de proteínas. Nesse contexto, em relação ao tipo de reparo, à lesão e às enzimas adequadas, assinale a alternativa correta.


A

O reparo por excisão de nucleotídeos ocorre para corrigir formação de dímero de pirimidinas e entre as enzimas envolvidas estão XPG e ERCCI-XPF em seres humanos.


B

A síntese de DNA translesão ocorre para correção de sítio apurínico ou erros de replicação e as enzimas envolvidas são a RecA e RecB em E.coli.


C

O reparo de quebras de dupla fita ocorre para substituição de bases nitrogenadas danificadas e tem a participação da enzima DNA glicosilase.


D

Erros de pareamento durante a replicação ocorrem com participação das enzimas DNA polimerase e DNA glicosilase.


E

O reparo por excisão de bases ocasionado por danificação da base tem a participação da enzima DNA fotoliase.

No processo de replicação do DNA, a separação das fitas moldes ocorre pela clivagem das ligações de hidrogênio entre as bases nitrogenadas.


Qual enzima é responsável por romper as ligações de hidrogênio na molécula do DNA?


A

DNA Ligase


B

Topoisomerase


C

DNA Polimerase


D

Primase


E

DNA Helicase

Durante a análise molecular voltada à detecção de fungos fitopatogênicos, o técnico realizou uma eletroforese em gel de agarose para avaliar os produtos de amplificação por PCR. Na etapa de interpretação dos resultados, o pesquisador detalhou os princípios físico-químicos que regem a separação dos ácidos nucleicos.


Com relação à técnica que utiliza o gel de agarose, assinale a alternativa INCORRETA


A

O marcador molecular é utilizado como referência para estimar o tamanho dos fragmentos de DNA.


B

A presença de bandas bem definidas geralmente indica boa qualidade da amplificação.


C

O brometo de etídio e outros corantes intercalantes podem ser utilizados para visualização do DNA.


D

O gel deve ser submetido à corrente elétrica para promover a migração das moléculas.


E

A conformação do DNA não influencia sua velocidade de migração.

No diagnóstico de doenças de plantas, a quantificação e avaliação de pureza do DNA de fitopatógenos são etapas cruciais antes de prosseguir com reações de PCR. A análise é feita medindo a absorbância em espectrofotômetro de microvolume. Com base nessa técnica, assinale a alternativa CORRETA.


A

Para quantificar DNA de fita dupla, avalia-se a absorbância de 280nm, considerando que uma absorbância de 1,0 equivale a uma concentração de 50ng/µL.


B

Uma razão de absorbância de A260/A280 entre 1,8 e 2,0 indica uma amostra de DNA puro, livre de contaminações significativas por proteínas.


C

O padrão de referência utilizado para a leitura da concentração de DNA é em 230nm, pois o material genético absorve luz fortemente nessa faixa do ultravioleta.


D

Se a razão A260/A280 for muito inferior a 1,6, isso é um indicativo característico de alta pureza do DNA e total ausência de impurezas como polissacarídeos ou sais.


E

A espectrofotometria por absorbância UV permite quantificar o DNA independentemente da presença de RNA, visto que ambos exibem picos de absorbância em comprimentos de onda distintos.

Ao cultivar Escherichia coli em um meio de cultura contendo concentrações limitantes de dois carboidratos, glicose e lactose, observa-se um padrão de crescimento bifásico denominado curva de crescimento diaúxico. Nesse cenário, a bactéria consome preferencialmente a glicose e, somente após a sua exaustão e uma breve fase de adaptação (fase lag), inicia o consumo da lactose. Considerando os mecanismos moleculares de regulação metabólica envolvidos nesse processo, é correto afirmar que


A

a presença de glicose estimula a atividade da enzima adenilato ciclase, aumentando os níveis intracelulares de AMP cíclico (AMPc), o que é essencial para a ativação do operon lac.


B

a repressão catabólica ocorre porque a glicose impede a entrada de lactose na célula através da inibição direta da enzima β-galactosidase, que é degradada por proteases citoplasmáticas na presença de monossacarídeos.


C

o complexo formado pela proteína receptora de AMPc (CRP ou CAP) e pelo AMPc liga-se ao promotor do operon lac, facilitando a ligação da RNA polimerase; contudo, na presença de glicose, os níveis de AMPc são baixos, impedindo essa ativação mesmo que a lactose esteja presente.


D

o operon lac é um sistema constitutivo, ou seja, suas enzimas são sintetizadas em taxas constantes independentemente da fonte de carbono disponível, sendo a diauxia explicada apenas pela velocidade de transporte passivo da glicose.


E

a lactose atua como um corepressor, ligando-se à proteína repressora (LacI) e aumentando sua afinidade pelo operador, o que bloqueia a transcrição dos genes estruturais lacZ, lacY e lacA enquanto houver glicose no meio.

Estratégias baseadas em RNA têm sido amplamente utilizadas para modulação da expressão gênica em terapias modernas. Sobre os mecanismos moleculares de siRNA, miRNA e shRNA, assinale a alternativa correta.


A

O siRNA e miRNA apresentam complementaridade perfeita com seus alvos, resultando exclusivamente em clivagem do mRNA.


B

O miRNA atua apenas no núcleo, inibindo a transcrição gênica diretamente.


C

O shRNA é transcrito no núcleo e processado pela maquinaria celular para gerar siRNA funcional.


D

O siRNA atua exclusivamente em DNA genômico, impedindo a transcrição.

Durante a fase de otimização de uma reação de PCR quantitativa, um pesquisador avalia diferentes concentrações de Mg²+. Ele observa que concentrações elevadas aumentam o rendimento. Com isso em mente, podemos afirmar que:


A

Altas concentrações de Mg²+ aumentam a fidelidade da Taq DNA polimerase.


B

O Mg²+ não influencia a atividade da DNA polimerase.


C

A concentração de Mg²+ ideal é fixa para todas as reações de PCR.


D

O Mg²+ atua como cofator essencial, mas em excesso favorece amplificação inespecífica.

A tecnologia de edição gênica baseada em CRISPR-Cas revolucionou a biotecnologia ao permitir modificações precisas no DNA. Esse sistema deriva de um mecanismo adaptativo presente em bactérias, que reconhecem e neutralizam material genético de vírus invasores por meio de sequências específicas armazenadas em seu genoma. Com base nesse mecanismo natural e em seus fundamentos moleculares, assinale a alternativa correta:


A

O sistema CRISPR promove a integração do DNA viral ao genoma bacteriano como estratégia de neutralização da infecção.


B

As proteínas Cas atuam apenas na regulação da expressão gênica bacteriana, sem participação direta na defesa contra vírus.


C

As sequências armazenadas no genoma bacteriano codificam proteínas que bloqueiam a entrada de vírus, atuando diretamente na membrana celular.


D

O RNA guia, produzido a partir do lócus CRISPR, direciona proteínas Cas para sequências específicas de DNA invasor, permitindo sua clivagem.


E

O sistema CRISPR atua exclusivamente por meio da degradação inespecífica de ácidos nucleicos, impedindo a replicação viral sem necessidade de reconhecimento de sequência.

O fluxo da informação genética, conhecido como dogma central da Biologia Molecular, envolve processos altamente controlados de síntese de ácidos nucleicos e proteínas. Sobre o tema, assinale a alternativa correta.


A

A replicação gera cópias do DNA no núcleo; a transcrição converte a informação do DNA em RNA mensageiro (RNAm); e a tradução utiliza o RNAm nos ribossomos para a síntese de proteínas.


B

A replicação é o processo de síntese de uma molécula de RNA a partir de um molde de DNA, ocorrendo exclusivamente no citoplasma das células eucariontes durante a fase G1 do ciclo celular.


C

A transcrição consiste na cópia fiel do genoma para a formação de novas moléculas de DNA, utilizando a enzima DNA polimerase e ocorrendo integralmente no interior dos ribossomos.


D

A tradução é o processo de síntese proteica que ocorre no núcleo celular, em que o RNA transportador (RNAt) lê os íntrons do DNA para sequenciar os aminoácidos da nova cadeia polipeptídica.


E

Em células eucariontes, todos os processos de replicação, transcrição e tradução ocorrem obrigatoriamente dentro da mesma organela membranosa, garantindo a rapidez da expressão gênica.

Na técnica de PCR em Tempo Real (qPCR), o sistema que utiliza sondas de hibridização do tipo TaqMan baseia-se em qual princípio para emissão de fluorescência?


A

Intercalação da sonda na fenda menor da dupla fita de DNA.


B

Emissão por transferência de energia (FRET) após a hidrólise da sonda pela atividade exonuclease 5’ → 3’ da polimerase.


C

Ligação covalente da sonda ao primer de sentido reverso.


D

Mudança conformacional da sonda após o anelamento em temperaturas superiores a 72ºC.


E

Oxidação do fluoróforo pela ação do magnésio presente no tampão.

Os ácidos nucleicos são macromoléculas responsáveis pelo armazenamento e transmissão da informação genética, apresentando diferenças estruturais que determinam sua estabilidade e função. Considerando as características químicas do Ácido Desoxirribonucleico - DNA e do Ácido Ribonucleico - RNA, analise as afirmativas a seguir.


I.O DNA possui a pentose desoxirribose e a base nitrogenada pirimídica timina, organizando-se geralmente em uma estrutura de dupla hélice antiparalela.

II.O RNA contém a base nitrogenada uracila no lugar da timina e apresenta o grupo hidroxila no carbono 2' da ribose, o que o torna mais suscetível à hidrólise.

III.As ligações fosfodiéster unem os nucleotídeos entre as bases nitrogenadas complementares através de pontes de hidrogênio estáveis no interior da molécula.


Está correto o que se afirma em:


A

I e II apenas.


B

III apenas.


C

I, II e III.


D

I e III apenas.


E

II apenas.

O fluxo da informação gênica, conhecido como dogma central da biologia molecular, compreende processos enzimáticos rigorosos de cópia e decodificação do material genético. No que diz respeito às enzimas e mecanismos envolvidos nestes processos, assinale a alternativa correta.


A

A transcrição é realizada pela enzima RNA polimerase, que utiliza as duas fitas de DNA simultaneamente como molde para sintetizar uma fita de RNA dupla.


B

A tradução inicia-se pela ligação da subunidade maior do ribossomo ao DNA genômico na região promotora TATA box localizada no compartimento citosólico.


C

A helicase é a proteína responsável por unir os fragmentos de Okazaki na fita descontínua através da formação de ligações de hidrogênio entre as desoxirriboses.


D

A DNA polimerase requer um iniciador de RNA, chamado primer, para iniciar a síntese da nova fita de DNA no sentido 5' para 3' durante a replicação.


E

A telomerase é uma enzima que promove a degradação dos terminais cromossômicos para evitar o envelhecimento celular precoce em células germinativas.

Com base na resolução nº 12, 01/08/2019, que dispõe sobre os requisitos técnicos para a realização de auditorias nos laboratórios e bancos que compõem a Rede Integrada de Bancos de Perfis Genéticos, é correto afirmar que:


A

A cada quatro anos, o Banco Nacional de Perfis Genéticos e os laboratórios participantes da Rede deverão ser auditados para averiguação de conformidade.


B

A equipe auditora deve ser constituída por profissional com experiência prévia de, no mínimo, dois anos, em biologia molecular ou celular, preferencialmente aplicada à identificação humana.


C

O laboratório ou o Banco Nacional de Perfis Genéticos deve enviar a documentação solicitada com, pelo menos, sete dias de antecedência à auditoria.


D

O prazo para regularização das não conformidades, dependendo da complexidade de sua resolução e do potencial impacto na qualidade dos resultados, será fixado entre quinze e trinta dias.


E

O processo de auditoria inicia-se com a notificação da gerência do laboratório a ser auditado ou do Banco Nacional de Perfis Genéticos, com antecedência mínima de noventa dias da data em que ocorrerá a averiguação.

A precipitação do DNA é feita por meio da utilização de etanol absoluto associado a uma solução com alta concentração de um sal catiônico.


O etanol induz a:


A

Desnaturação irreversível do DNA, com rompimento das ligações fosfodiéster e consequente degradação completa da molécula genética.


B

Agregação e precipitação dos ácidos nucleicos, concentrando o DNA e auxiliando na remoção de resíduos de fenol e clorofórmio da amostra.


C

Amplificação seletiva do DNA mediada pelo sal catiônico, dispensando etapas de extração e purificação do material genético.


D

Conversão direta do DNA em RNA mensageiro solúvel, permitindo sua análise funcional imediata.


E

Ativação de nucleases dependentes de etanol absoluto, promovendo a digestão controlada do DNA extraído.

Laboratórios que desenvolvem pesquisas/atividades de biotecnologia possuem infraestrutura de equipamentos e insumos necessários ao cultivo celular, manipulação genética, microbiológica, envolvendo uma diversidade de possibilidades experimentais. Dentre as alternativas apresentadas, qual descreve um conjunto de instrumentação com aplicações em análise de DNA?


A

Bioreatores, fermentadores, hidroponia, biobalística.


B

Incubadora de CO2, microscópio invertido, fermentadores.


C

Autoclave, balança de precisão, espectrofotômetro de microvolume (nanodrop)


D

Termociclador, sequenciador de nucleotídeos, espectrofotômetro de microvolume (nanodrop), eletroforese em gel.

Qual, dentre as alternativas apresentadas a seguir é correta, em relação a reação em cadeia da polimerase:


A

A técnica não se aplica a estudos com DNA mitocondiral ou de cloroplastos.


B

A reação em cadeia da polimerase representa o fundamento da técnica que permite a replicação in vitro do DNA.


C

A polimerase envolvida no processo é uma enzima universalmente envolvida na degradação de Primers de RNA.


D

Kary Banks Mullis recebeu o prêmio Nobel de medicina, em 1995, por suas contribuições sobre as aplicações da PCR.

O método de DNA metabarcoding tem sido utilizado para analisar a comunidade planctônica. Por meio do sequenciamento em massa do DNA presente diretamente em amostras de água coletada, é possível determinar a diversidade de espécies da comunidade. Nessa abordagem, o DNA é sequenciado por meio do método de


A

sequenciamento de Sanger.


B

sequenciamento de nova geração.


C

degradação química de Maxam-Gilbert.


D

reação em cadeia da polimerase.

A replicação do DNA é um processo semiconservativo, bidirecional e de alta fidelidade, essencial para a manutenção da integridade genômica durante a divisão celular. Para que a dupla hélice seja copiada, um complexo multiproteico denominado replissomo coordena a ação de diversas enzimas que atuam de forma sincronizada na forquilha de replicação. Devido à natureza antiparalela das fitas de DNA e à restrição bioquímica das DNA-polimerases, a síntese das novas cadeias ocorre de maneira distinta nas fitas contínua (leading strand) e descontínua (lagging strand). ALBERTS, Bruce et al. Biologia molecular da célula. 6. ed. Porto Alegre: Artmed, 2017.


Com base na sequência de eventos da replicação e na função das principais enzimas envolvidas em procariotos e eucariotos, assinale a alternativa INCORRETA:


A

A helicase utiliza a energia da hidrólise de ATP para romper as pontes de hidrogênio entre as bases nitrogenadas, promovendo a abertura da dupla hélice, enquanto as proteínas de ligação à fita simples (SSB) impedem a reanelação prematura das fitas moldes.


B

A primase é uma RNA-polimerase especializada que sintetiza curtos iniciadores (primers) de RNA, fornecendo a extremidade 3’-OH livre necessária para que a DNA-polimerase inicie a polimerização dos desoxirribonucleotídeos.


C

Na fita descontínua (lagging strand), a síntese ocorre acompanhando o sentido 3’ → 5’ da fita molde, por meio da formação dos fragmentos de Okazaki, permitindo que a DNA-polimerase mantenha a continuidade da polimerização durante o avanço da forquilha de replicação.


D

A DNA-topoisomerase (ou girase, em bactérias) atua à frente da forquilha de replicação para aliviar a tensão de torção e o superenrolamento positivo gerados pelo desenrolamento da hélice pela helicase.


E

A DNA-ligase catalisa a formação da ligação fosfodiéster entre o grupo 3’-OH de um fragmento de DNA e o grupo 5’-fosfato do fragmento adjacente, unindo os fragmentos de Okazaki após a remoção dos primers de RNA e o preenchimento das lacunas.

   
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