Questões de Concurso sobre Biologia molecular

Espectrofotômetro; leitor de ELISA e microscópio óptico.

Termociclador tipo qPCR/RT-qPCR; transiluminador e freezer - 80C.

Termociclador tipo PCR; Sequenciador de nucleotídeos e Sistema de eletrofores em gel.

Cromatógrafo; espectropolalímetro de dicroismo celular e Sistema de eletroforese em gel.

2400 e 9600.

1200 e 4800.

1200 e 9600.

2400 e 4800.

1600 e 2400.

O reparo por excisão de nucleotídeos ocorre para corrigir formação de dímero de pirimidinas e entre as enzimas envolvidas estão XPG e ERCCI-XPF em seres humanos.

A síntese de DNA translesão ocorre para correção de sítio apurínico ou erros de replicação e as enzimas envolvidas são a RecA e RecB em E.coli.

O reparo de quebras de dupla fita ocorre para substituição de bases nitrogenadas danificadas e tem a participação da enzima DNA glicosilase.

Erros de pareamento durante a replicação ocorrem com participação das enzimas DNA polimerase e DNA glicosilase.

O reparo por excisão de bases ocasionado por danificação da base tem a participação da enzima DNA fotoliase.

DNA Ligase

Topoisomerase

DNA Polimerase

Primase

DNA Helicase

O marcador molecular é utilizado como referência para estimar o tamanho dos fragmentos de DNA.

A presença de bandas bem definidas geralmente indica boa qualidade da amplificação.

O brometo de etídio e outros corantes intercalantes podem ser utilizados para visualização do DNA.

O gel deve ser submetido à corrente elétrica para promover a migração das moléculas.

A conformação do DNA não influencia sua velocidade de migração.

Para quantificar DNA de fita dupla, avalia-se a absorbância de 280nm, considerando que uma absorbância de 1,0 equivale a uma concentração de 50ng/µL.

Uma razão de absorbância de A260/A280 entre 1,8 e 2,0 indica uma amostra de DNA puro, livre de contaminações significativas por proteínas.

O padrão de referência utilizado para a leitura da concentração de DNA é em 230nm, pois o material genético absorve luz fortemente nessa faixa do ultravioleta.

Se a razão A260/A280 for muito inferior a 1,6, isso é um indicativo característico de alta pureza do DNA e total ausência de impurezas como polissacarídeos ou sais.

A espectrofotometria por absorbância UV permite quantificar o DNA independentemente da presença de RNA, visto que ambos exibem picos de absorbância em comprimentos de onda distintos.

a presença de glicose estimula a atividade da enzima adenilato ciclase, aumentando os níveis intracelulares de AMP cíclico (AMPc), o que é essencial para a ativação do operon lac.

a repressão catabólica ocorre porque a glicose impede a entrada de lactose na célula através da inibição direta da enzima β-galactosidase, que é degradada por proteases citoplasmáticas na presença de monossacarídeos.

o complexo formado pela proteína receptora de AMPc (CRP ou CAP) e pelo AMPc liga-se ao promotor do operon lac, facilitando a ligação da RNA polimerase; contudo, na presença de glicose, os níveis de AMPc são baixos, impedindo essa ativação mesmo que a lactose esteja presente.

o operon lac é um sistema constitutivo, ou seja, suas enzimas são sintetizadas em taxas constantes independentemente da fonte de carbono disponível, sendo a diauxia explicada apenas pela velocidade de transporte passivo da glicose.

a lactose atua como um corepressor, ligando-se à proteína repressora (LacI) e aumentando sua afinidade pelo operador, o que bloqueia a transcrição dos genes estruturais lacZ, lacY e lacA enquanto houver glicose no meio.

O siRNA e miRNA apresentam complementaridade perfeita com seus alvos, resultando exclusivamente em clivagem do mRNA.

O miRNA atua apenas no núcleo, inibindo a transcrição gênica diretamente.

O shRNA é transcrito no núcleo e processado pela maquinaria celular para gerar siRNA funcional.

O siRNA atua exclusivamente em DNA genômico, impedindo a transcrição.

Altas concentrações de Mg²⁺ aumentam a fidelidade da Taq DNA polimerase.

O Mg²⁺ não influencia a atividade da DNA polimerase.

A concentração de Mg²⁺ ideal é fixa para todas as reações de PCR.

O Mg²⁺ atua como cofator essencial, mas em excesso favorece amplificação inespecífica.

O sistema CRISPR promove a integração do DNA viral ao genoma bacteriano como estratégia de neutralização da infecção.

As proteínas Cas atuam apenas na regulação da expressão gênica bacteriana, sem participação direta na defesa contra vírus.

As sequências armazenadas no genoma bacteriano codificam proteínas que bloqueiam a entrada de vírus, atuando diretamente na membrana celular.

O RNA guia, produzido a partir do lócus CRISPR, direciona proteínas Cas para sequências específicas de DNA invasor, permitindo sua clivagem.

O sistema CRISPR atua exclusivamente por meio da degradação inespecífica de ácidos nucleicos, impedindo a replicação viral sem necessidade de reconhecimento de sequência.

A replicação gera cópias do DNA no núcleo; a transcrição converte a informação do DNA em RNA mensageiro (RNAm); e a tradução utiliza o RNAm nos ribossomos para a síntese de proteínas.

A replicação é o processo de síntese de uma molécula de RNA a partir de um molde de DNA, ocorrendo exclusivamente no citoplasma das células eucariontes durante a fase G1 do ciclo celular.

A transcrição consiste na cópia fiel do genoma para a formação de novas moléculas de DNA, utilizando a enzima DNA polimerase e ocorrendo integralmente no interior dos ribossomos.

A tradução é o processo de síntese proteica que ocorre no núcleo celular, em que o RNA transportador (RNAt) lê os íntrons do DNA para sequenciar os aminoácidos da nova cadeia polipeptídica.

Em células eucariontes, todos os processos de replicação, transcrição e tradução ocorrem obrigatoriamente dentro da mesma organela membranosa, garantindo a rapidez da expressão gênica.

Intercalação da sonda na fenda menor da dupla fita de DNA.

Emissão por transferência de energia (FRET) após a hidrólise da sonda pela atividade exonuclease 5’ → 3’ da polimerase.

Ligação covalente da sonda ao primer de sentido reverso.

Mudança conformacional da sonda após o anelamento em temperaturas superiores a 72ºC.

Oxidação do fluoróforo pela ação do magnésio presente no tampão.

I e II apenas.

III apenas.

I, II e III.

I e III apenas.

II apenas.

A transcrição é realizada pela enzima RNA polimerase, que utiliza as duas fitas de DNA simultaneamente como molde para sintetizar uma fita de RNA dupla.

A tradução inicia-se pela ligação da subunidade maior do ribossomo ao DNA genômico na região promotora TATA box localizada no compartimento citosólico.

A helicase é a proteína responsável por unir os fragmentos de Okazaki na fita descontínua através da formação de ligações de hidrogênio entre as desoxirriboses.

A DNA polimerase requer um iniciador de RNA, chamado primer, para iniciar a síntese da nova fita de DNA no sentido 5' para 3' durante a replicação.

A telomerase é uma enzima que promove a degradação dos terminais cromossômicos para evitar o envelhecimento celular precoce em células germinativas.

alteração da sequência do DNA.

mudanças de bases nitrogenadas.

mutações cromossômicas.

metilação do DNA.

É facultativo aos usuários do laboratório, incluindo o técnico, realizar os procedimentos seguindo o POP.

O POP deverá ter várias versões vigentes de um mesmo procedimento, ficando a critério do técnico a escolha de qual versão usar.

O POP deverá conter informações claras e inequívocas com revisão periódica, que permitam a execução de um procedimento técnico.

Para ter acesso ao POP de determinado procedimento é necessário aos usuários do laboratório a solicitação prévia do documento ao gestor do laboratório.

A síntese de DNA ocorre no sentido 3' → 5', pois a enzima DNA polimerase necessita de uma extremidade 5' livre para adicionar novos nucleotídeos.

A DNA polimerase inicia a síntese de DNA diretamente sobre a fita molde e adiciona nucleotídeos na extremidade 5' da cadeia em crescimento.

A DNA polimerase reconhece erros durante a replicação, mas não possui capacidade de removê-los, sendo essa função exclusiva de outras enzimas do sistema replicativo.

A replicação semiconservativa caracteriza-se pela formação de duas moléculas-filhas compostas apenas por cadeias recém-sintetizadas.

A DNA polimerase adiciona nucleotídeos na extremidade 3' da cadeia em formação, razão pela qual a síntese da nova fita ocorre no sentido 5' → 3'.

Em células procarióticas, a metilação ocorre apenas em resíduos de citosina, não sendo observada em adenina.

Em células eucarióticas, a metilação do DNA ocorre predominantemente em resíduos de citosina, formando a 5-metilcitosina.

A metilação do DNA é um processo espontâneo que ocorre independentemente da ação de enzimas específicas.

A metilação do DNA ocorre exclusivamente em resíduos de adenina em eucariotos, sendo responsável pela alteração direta da sequência de bases do DNA.

A metilação do DNA promove sempre mutações permanentes na sequência genética do organismo.

A centrifugação é uma técnica necessária no processo de extração de DNA.

O manuseio de amostras de DNA não exige uso de luvas ou plásticos descartáveis.

Assim como ocorre para a extração de proteínas, a lise celular não é necessária para a extração de DNA.

A insolubilidade do DNA em água permite a sua extração facilitada do meio celular por meio de precipitação.

Amplificação do DNA por PCR seguida de hibridização reversa do DNA amplificado com sondas específicas (já imobilizadas na membrana do chip) que levam a uma reação colorimétrica caso as sondas se liguem ao DNA.

Amplificação por PCR em tempo real, seguida por emissão de fluorescência das sondas específicas para cada patógeno analisado; as sondas são imobilizadas no chip, onde a fluorescência é detectada.

Imobilização de anticorpos contra sequências específicas de DNA de patógenos na membrana do chip, com reação caso haja amplificação do DNA do patógeno na amostra do paciente.

Reação de amplificação isotérmica do DNA, acoplada com uma hibridização reversa do DNA, que utiliza sondas específicas já imobilizadas na membrana do chip; a visualização é colorimétrica, caso as sondas se liguem ao DNA amplificado.